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谢 谢!! 一 、过氧化物酶体中的酶类 1. 过氧化氢酶 - 触酶 催化反应如下: 2H2O2 → 2H2O + O2 过氧化氢酶存在于细胞的过氧化物酶体中, 可将细胞产生过多的H2O2 清除。 二、微粒体氧化酶类 加单氧酶 催化一个氧原子加到底物分子上(羟化), 另一个氧原子被氢(NADPH+H+)还原形成水。 催化的反应: RH+NADPH+H+ +O2 → ROH+NADP++H2O 加单氧酶反应 2. 加双氧酶 催化氧分子中2个氧原子加到作用物中特定 双键的2个碳原子上。 例如: 细胞色素还原酶 Complex Ⅲ结构示意图 4.复合体Ⅳ (细胞色素氧化酶) 复合体Ⅳ将电子从细胞色素c传递给氧。 细胞色素氧化酶 Complex Ⅳ结构示意图 各复合物之间的相互关系 (三)呼吸链组分的排列顺序 呼吸链组分的排列顺序可通过下列实验确定: 标准氧化还原电位 2. 各组分特有的吸光谱的不同进行检测 3. 特异的抑制剂 4. 拆离或重组各复合体 呼吸链中各种氧化还原对的标准氧化还原电位 主要的呼吸链 NADH氧化呼吸链 NADH→复合体Ⅰ→ Q →复合体Ⅲ→ Cyt c → 复合体Ⅳ → O2 2. 琥珀酸氧化呼吸链 琥珀酸→复合体Ⅱ→ Q →复合体Ⅲ→ Cyt c → 复合体Ⅳ → O2 二 、氧化磷酸化 (oxidative phosphorylation) 定义 呼吸链电子传递过程中耦联ADP磷酸化, 生成ATP, 又称耦联磷酸化。 底物水平磷酸化 (substrate level phosphorylation) 底物分子内部能量重新分布,生成 高能键,使ADP磷酸化生成ATP的过程。 (一)氧化磷酸化耦联部位 氧化磷酸化的耦联部位可通过以下实验方法来确定: 测定不同作用物经呼吸链氧化的P/O比值 计算自由能变化 P/O比值的定义 指每消耗1摩尔氧原子所消耗的无机磷酸的 摩尔数(或ADP摩尔数),即生成ATP的摩尔数。 线粒体离体实验测得的一些底物的P/O比值 1 0.61-0.68 Cyt aa3→O2 Cytc(Fe2+) 1 0.88 Cyt c→Cyt aa3→O2 抗坏血酸 2 1.7 FMN→UQ→Cyt→O2 琥珀酸 3 2.4 - 2.8 NAD+ →FMN→UQ→Cyt→O2 β-羟丁酸 生成ATP数 P/O比值 呼吸链的组成 底物 计算自由能变化 自由能变化(△G0 )与电位变化(△E’) 之间存在以下关系: △G0=-nF△E 能 102.3kJ/mol 0.53V Cytaa3~ O2 能 40.5kJ/mol 0.21V CoQ~Cyt c 能 69.5kJ/mol 0.36V NAD~ CoQ 能否生成ATP 自由能变化 电位变化 区段 电子传递自由能变化 (二)氧化磷酸化耦联机制 化学渗透假说 (chemiosmotic hypothesis) 电子经呼吸链传递时,可将质子(H+) 从线粒体内膜的基质侧泵到胞浆侧,造成膜内、 外质子电化学梯度,以此储存能量。 当质子 顺梯度回流时驱动ADP与Pi生成ATP。 化学渗透学说 2. ATP合酶(ATP Synthase) ATP合酶由疏水的F0 (a1b2c9-12亚基)部分 亲水的F1 (α3β3γδε亚基)部分组成。 F1功能是催化ATP生成,β亚基为催化亚基, 但β亚基只有与α亚基结合才有催化活性。 ATP合酶结构模式图 (三)影响氧化磷酸化的因素 ADP ADP 甲状腺激素 抑制剂 (1) 电子传递抑制剂 特异部位阻断呼吸链的电子传递 (2) 氧化磷酸化抑制剂 抑制电子传递和ADP磷酸化 (3) 解耦联剂 (uncoupler) 使氧化与磷酸化耦联脱离 电子传递链与抑制剂 三、 ATP与能量代谢 高能磷酸键与高能化合物 高能磷酸键 水解时释放大于21kJ/mol的磷酸酯键, 常用“~P”号表示。 高能化合物 含有高能磷酸
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