生物统计学讨论要点.pptx

泌乳母猪精氨酸水平对哺乳仔猪 小肠黏膜发育的影响 小组成员：xxx xxx ● 试验目的 ● 试验方案 ● 研究结果 ● 个人总结 目录 试验目的 本试验旨在研究泌乳母猪饲粮精氨酸水平对哺乳仔猪小肠黏膜发育的影响及其抗氧化作用机理。 试验方案 一、试验材料和试验设计 试验选择遗传一致, 2~4胎、体重、膘情和预产期相近的长大二元杂交经产母猪36头, 于妊娠110d左右进入产房, 随机分为0. 82%精氨酸组(n=12)、1.23%精氨酸组(n=12)和1.64% 精氨酸组(n=12)3个组。饲粮精氨酸水平分别为0.82%、1. 23% 和1.64%, 添加L - 精氨酸盐酸盐使饲粮精氨酸含量达到需要的值, 添加L - 丙氨酸平衡饲粮以保持各组饲粮等氮, 其他营养含量均满足或超NRC( 1998) 推荐量。 试验从产后第4天开始至第22天断奶时结束。 试验方案 二、饲养管理 母猪分娩当天作为产后第1 天, 18: 00 以后分娩的按次日计算, 仔猪随母猪饲养在带有保温设施的高床产房里。母猪产后最初几天采用定量限饲的方式进行饲喂, 其中第1 天、第2 天和第3 天分别饲喂0.7、1.4 和2.1 kg 饲粮, 第4 天和第5 天分别饲喂3.1 和4.1 kg 饲粮, 第6 天以后自由采食。每日饲喂2 次, 自由饮水。母猪产后48 h 内调整母猪窝仔数达到10 头, 并于产后第4 天清晨根据仔猪体重进行调整, 保证各组母猪所带仔猪重量基本一致, 试验期间仔猪不补料。 试验方案 三、样品的收集和处理 仔猪21 日龄断奶, 断奶当日清晨, 每组选6头接近平均体重的仔猪, 共18头。所选仔猪屠宰后, 切开腹腔取出全部小肠, 迅速置入放有双抗的冰冻PBS 溶液中。剪开肠系膜,将肠段打开, 分别取十二指肠、空肠、回肠各2段, 每段2~ 3 cm。其中1段放入10%的福尔马林固定液中, 以备光镜观察; 另外1段放入PBS液中, 洗净后剪成5mm左右的小块, 放入装有4%戊二醛固定液的小瓶中, 以备电镜观察。接着再取各肠段(十二指肠、空肠、回肠) , 剪成5cm的小段, 剖开肠管, 冰冻PBS液冲洗干净后, 用定性滤纸将黏膜表面的PBS 液吸干, 用载玻片将肠黏膜轻轻地刮下来,1.5mL离心管分装后液氮保存,待测。 试验方案 四、测定指标和方法 1. 哺乳仔猪小肠黏膜绒毛结构的光镜和电镜观察 2. 哺乳仔猪小肠黏膜组织预处理 3. 哺乳仔猪小肠黏膜组织蛋白质含量的测定 4. 哺乳仔猪小肠黏膜组织乳糖酶与碱性磷酸酶活性的测定 5. 哺乳仔猪小肠黏膜组织谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px) 、超氧化物歧化酶( SOD) 活性和丙二醛( MDA) 含量的测定 试验方案 五、数据统计与处理方法 全部数据进行方差分析, 用Duncan氏法进行多重比较, 并进行回归分析, 设定P 0.05 为差异显著。所有数据均以平均值±标准误( mean±SE) 表示。 研究结果 一、泌乳母猪饲粮精氨酸水平对哺乳仔猪小肠黏膜绒毛形态的影响 研究结果 研究结果 绒毛高度： ①十二指肠：0.82%精氨酸组与1.23%精氨酸组差异显著，0.82%精氨酸组与1.64%精氨酸组差异显著，1.23%精氨酸组与1.64%精氨酸组差异不显著。 经线性回归分析可得：十二指肠粘膜绒毛高度与泌乳母猪饲粮精氨酸水平呈线型相关，其回归方程为y=50.166x+249.06（γ=0.49，P0.05）； ②空肠与回肠：三组不同水平精氨酸对绒毛高度的影响无显著差异。（P0.05） 研究结果 隐窝深度： ①十二指肠：0.82%精氨酸组与1.23%精氨酸组无显著差异，0.82%精氨酸组与1.64%精氨酸组差异显著，1.23%精氨酸组与1.64%精氨酸组差异不显著。 隐窝深度与精氨酸水平呈线性相关，其回归方程为：y=-17.083x+204.184(γ=0.47，P0.05) ②空肠：0.82%精氨酸组与1.23%精氨酸组差异显著，0.82%精氨酸组与1.64%精氨酸组差异显著，1.23%精氨酸组与1.64%精氨酸组差异不显著。隐窝深度与精氨酸水平呈线性相关，其回归方程为：y=-37.961x+186.044(γ=0.56，P0.05)； ③回肠：0.82%精氨酸组与1.23%精氨酸组无显著差异，0.82%精氨酸组与1.64%精氨酸组差异显著，1.23%精氨酸组与1.64%精氨酸组差异不显著。隐窝深度与精氨酸水平呈线性相关，其回归方程为：y=-51.602x+188.168(γ=0.57，P0.05)。 研究结果 二、泌乳母猪饲粮精氨酸水平对哺乳仔猪小肠粘膜乳糖酶与碱性磷酸酶的影响 研究结果 研究结果 乳糖酶： ①十二指肠：0.82%精氨酸组与1.23