化学发放法检测原理-Grace研讨.pptVIP

ADVIA CentaurADVIA Centaur CPADVIA Centaur XP全自动化学发光分析系统检测原理 经典直接化学发光方法 吖啶酯为放光剂 采用微磁颗粒分离 两种结合模式： 竞争法 夹心法 免疫测定 抗原抗体特意专一结合是检测的基础 发光剂是检测的技术核心 吖啶酯简介 提升扩散速率 最大程度避免结合位点的遮蔽 提高分析灵敏度 吖啶酯简介 一秒钟高强度的光释放使报告结果更快 哎啶酯直接化学发光法的优点 无需额外的信号放大或底物 光的释放快速 对温度和pH值的影响不敏感 背景干扰最小 微磁颗粒分离技术 氧化铁颗粒被吸引至磁场区 与抗原或抗体发生共价结合 微磁颗粒分离技术 用于分离结合与未结合的反应物 检测原理的反应模式 夹心法 竞争法 标记抗原检测方法 标记抗体检测方法 抗体捕获模式 夹心法 – 步骤 1 抗体捕获模式 分析物是样品中含有的抗体 采用一种直接针对样品中抗体的特异性抗体 抗体捕获模式 结合有抗人类IgM特异性抗体的微磁颗粒（PMP）被加入到样品中 人类IgM抗体与PMP上结合的抗人类IgM抗体进行结合 抗体捕获模式 样品中的抗体通过磁场作用与可能造成干扰的其它物质进行分离 抗体捕获模式 加入对样品中抗体具有亲和力的AE-标记抗体 抗体捕获模式 未结合的AE标记抗原从结合物中被分离出来 抗体捕获模式 在这个抗体捕获模式的例子中，样品浓度和光释放强度之间有直接的关系 Another advantage of acridiunium ester is the intense, rapid flash. Most of the reaction is completed within one second. This results in a faster turnaround time. The small size of acridinium ester means an increased diffusion rate, minimized stearic hindrance (blockage of binding sites) which results in increased assay sensitivity. Antibodies are used in immunoassays because they bind to specific antigens. In an immunoassays, the antigen is the analyte that we want to measure. Another characteristic of antibodies is that we can covalently bind an organic molecule such as AE to the antibody without effecting it’s ability to bind to an antigen. We use paramagnetic particles to separate materials that we do not want to measure. Paramgnetic particles are iron oxide crystals that are attracted to a magnetic field. They may be coated with antibody or antigen. The particles are attracted to a magnetic field. Anything bound to the particles will stay with the particles. Anything not bound to the particles can be removed. Antibody-antigen binding, chemiluminescence, and paramagnetic particle separation are used in the following three formats. Acridinium Ester labeled Antibodies that are specific to the sample antigen are added to the sample. 抗体 抗原 示踪/发光剂：吖啶酯 分离方法：微磁颗粒分离 检测装置 抗原 抗体 结合位点 AE 抗原 抗体 结合位点 碱性磷酸酶 哎啶酯 光释放 (RLUs) 时间 (妙) 1 2 微磁颗粒(PMP) 抗体 磁场 未结合的AE AE-标记抗体加入样品中，与样