核磁共振-NMR参数研讨.ppt

* 溶剂皆为CCl4 氢键形成时要有几乎裸露的质子和电负性大，半径小的原子，而且二者要能接近，温度升高时二者距离增大，则作用力减小 * * 甲基CH3质子的共振峰分裂成三重峰，其强度比约为1:2:1, 次甲基CH2质子共振峰分裂成四重峰， 其强度比约为1:3:3:1。 * 纵向驰豫又称自旋晶格驰豫；横向驰豫又称自旋-自旋驰豫。 射频作用下，低能级核吸收能量向高能级跃迁。如果高能级的核不能及时回到低能级，低能级上的核总数将减少，使两能级上的数量趋于相等，此时，自旋核系统对射频的吸收将减少或完全不能吸收，导致核磁共振信号减小或消失，即饱和（saturation）。 射频脉冲结束之后，核磁矩解脱了射频场的影响，而只受到主磁场 的作用，进行“自由运动”。所有核磁矩力图恢复到原来的热平衡状态。 * 自旋去耦 　自旋耦合引起谱线分裂，一个自旋量子数为I的核X与另一核A间如果存在自旋耦合，因X核磁矩有2I+1种空间取向,它加在A核处的局部磁场有2I+1个值，使得A核有2I+1个共振频率,核的共振线就分裂成2I+1条。如果有多个核互相耦合,谱线变得很复杂，而且很弱,难于分析。如果同时将满足X 核共振条件的电磁波（干扰电磁波）加于体系,则X核的共振使其在那2I+1种取向中快速变化，结果X核的平均磁矩为零，对A核不再有耦合作用,A的谱线简化为一条，强度也相应增加，这即自旋去耦。 * (6) A2X3系统 共7条谱线，A 为4条， X 为3条， A 的强度比为1：3：3：1， X 的为1：2：1 例如，CH3CH2OH RCOOCH2CH3 耦合常数的分类 同核耦合常数 异核耦合常数 近程耦合常数 远程耦合常数 单键耦合常数1J 同碳耦合常数2J 邻位耦合常数3J 自旋耦合的传递过程中，两端的核一定要具有核自旋，但中间的核却不一定 耦合常数和生物大分子构象 耦合常数的分类 多肽构象 多肽构象 多肽是由多个氨基酸组成的，氨基酸之间通过肽键（酰胺键）连接，肽键具有部分双键性质，不能自由旋转 多肽主链的二面角 A-B-C-D定义二面角，C-D相对A-B顺时针转为正，逆时针转为负，重叠为零 邻位耦合常数J 和二面角? Karplus关系 3J＝Acos2?+Bcos?+Csin2? ? 角和 ? 角的关系 L－氨基酸 ：?=??-60?? ? 角和 ? 角的关系 D－氨基酸 ：?=??+60?? 因此每一个 ? 角对应于2个 ? 角，而对于大多数3JH-N-C?-H，每一个耦合常数3JH-N-C?-H又对应于二个 ? 值, 因此有四个可能的 ? 角对应于观察到的3JH-N-C?-H值 Karplus-Bystov关系式和构象能的计算相结合，或简单地和构象能图相结合可以帮助正确选择可能的二面角 对L-氨基酸来说： 右手?螺旋 3JH-N-C?-H?3.9Hz (?＝-57?) 310螺旋 3JH-N-C?-H?4.2Hz (?＝-60?) 反平行?折叠 3JH-N-C?-H?8.9Hz (?＝-139?) 平行?折叠 3JH-N-C?-H?9.7Hz (?＝-119?) 峰强、驰豫和线宽 峰 的 数 目: 标志分子中磁不等性质子的种类，多少种； 峰的强度(面积)比: 每类质子的数目(相对)，多少个； 峰 的 位 移 值(δ): 每类质子所处的化学环境、化合物中位置； 峰 的 裂 分 数 : 相邻碳原子上质子数； 偶 合 常 数 (J): 确定化合物构型。 n* n0 非电磁辐射形式释放能量 驰豫现象：高能态的核以非辐射形式释放能量，回到低能态，维持n0略大于n*，致使核磁共振信号存在，这种过程称为“驰豫”。 驰豫 当n0= n*时，就观察不到NMR信号，这种现象称为“饱和”。 驰豫现象是NMR得以保持的必要条件。由于受到核外电子云的屏蔽作用，无法通过碰撞释放能量。 n0 吸收电磁辐射 n* 饱和现象 纵向驰豫（T1） 纵向驰豫是高能原子核将其多余能量交给周围介质而返回低能态的过程。 高能态核平均寿命有关的一个量，并强烈受体系运动性影响。 横向驰豫（T2） 横向驰豫是由于磁场不均等因素引起的磁化矢量的相移。 由于磁场的不均一，会导致谱线增宽。线宽为横向驰豫时间的倒数。分子翻滚速率、溶液粘度和分子内部运动性等影响线宽。 Backbone dynamics of the tandem zincfinger domain of Stc1 R2/R1 is related to the overall tumbling of the protein.