水分析化学第8章研讨.ppt

3 显色条件的确定 对显色反应的要求 选择性好，显色条件易于控制，重现性好； 灵敏度高，一般ε10 4; 生成的显色化合物稳定； 显色化合物与显色剂的颜色差异大，显色剂在测定波长处无明显吸收, 对照性好, Δ?max 60 nm 显色反应的类型 2 显色剂 无机显色剂： 有机显色剂 ：多为螯合剂，形成的络合物稳定、选择性好，灵敏度高等，常用 有机显色剂 3 显色条件的确定——单因素试验法 2) 显色反应酸度 邻二氮菲－亚铁反应完全程度与pH的关系 4）溶剂的选择：测量波长应大于透明区波长 4 测量条件的选择 3) 参比液的选择 参比溶液选择举例 例:邻二氮菲光度法测水中的 Fe， 1）若显色剂及其他试剂有颜色， 参比溶液：溶剂+所有试剂。 2）若待测样品中有干扰组分与显色剂反应生成有色物质， 参比溶液：待测样品+所有试剂+被测组分掩蔽剂 5 测定中的干扰以及消除方法 8.4 吸光光谱法的定量方法 1、绝对法：测定样品的吸光度，由A=εc L求出c，但须知吸光系数ε、光程L 2、标准对照法：在同样条件下分别测定标准溶液（浓度为已知c标 ）和样品溶液的吸光度，然后求出被测样品的浓度 3、标准曲线法：校正 4、回归分析法：c=a A + b , a, b为回归系数 5、解联立方程组：利用吸光度的加和性，求多组分的浓度 6、双波长分光光度法：自学 7、示差分光光度法：透光率调零和100%的方法不同 用cs cx 的标准溶液调T=0% 或用cs cx 的标准溶液调T=100% 8.5 应用实例 天然水中Fe2+的测定 废水中Cd2+测定：双硫腙比色法（λmax=518nm） 水中微量酚的测定：4—氨基安替比林分光光度法（λmax=510nm） 水中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮及总氮的测定 配置标准溶液、绘制特征吸收曲线，确定λmax ①配制系列标准溶液0、C标1 C标2 。。。 ，显色反应：Fe2++3phen=Fe(phen)2+3 ②测量同一浓度标准溶液不同波长下的吸光度，每隔10nm测定一次，找出最大的吸收波长λmax(每变化波长，用空白溶液重新调零) （λmax=510nm） 做工作曲线（标准曲线）、测水样Fe2+ ③用1cm比色皿 在λmax=510nm下测定标准溶液的吸光度A标，绘制标准曲线A标~ C标 ④未知水样显色反应，测未知水样的A未，在该标准曲线上找出相应的C未 总铁的测定 在水样中加NH2OH·HCl（盐酸羟胺）或抗坏血酸还原Fe3+: 重复Fe2+的测定步骤 干扰及消除 干扰：消除方法： 强氧化剂、氰化物、亚硝酸盐、焦磷酸盐、偏聚磷酸盐及某些重金属离子 经过加酸煮沸可将氰化物及亚硝酸盐除去，并使焦磷酸、偏聚磷酸盐转化为正磷酸盐以减轻干扰。 加入盐酸羟胺则可消除强氧化剂的影响。 邻菲啰啉能与某些金属离子形成有色络合物而干扰测定 在乙酸-乙酸铵的缓冲溶液中，不大于铁浓度10倍的铜、锌、钴、铬及小于2mg/L的镍，不干扰测定；当浓度再高时，可加入过量邻菲啰啉显色剂予以消除。汞、镉、银等能与邻菲啰啉形成沉淀，若浓度低时，可加过量邻菲啰啉来消除；浓度高时，可将沉淀过滤除去。 水样含有大量有机物或底色较深，可用不加邻菲啰啉的试液作参比，对水样的底色进行校正，或将水样蒸干、灰化后用酸重新溶解再测定。 凯氏定氮法原理 消化：样品与浓硫酸和催化剂（硫酸铜）一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。 蒸馏：加碱蒸馏，使氨蒸出。 吸收：用H3BO3吸收 滴定：以标准HCl溶液滴定。根据标准酸消耗量可以计算出蛋白质的含量。 或纳氏试剂光度法测氨氮 食品和其原料中蛋白质含量的测定，国内外普遍应用凯氏定氮法测定总氮量，然后乘一个蛋白质换算系数。 蛋白质换算系数： 牛奶造假 凯氏定氮只能测出含氮量而无法测出氮的来源。一些非蛋白原料, 如尿素以及尿素类成品可以通过检测氨氮的方法检测出来, 而三聚氰胺抗氨氮测定 三聚氰胺分子式:C3N6H6，是一种重要的氮杂环有机化工原料。其分子中含氮量为66.6%, 折合成粗蛋白含量为416.27%, 掺入少量就可以迅速提高蛋白含量。加上三聚氰胺为白色粉末, 易被染色, 很容易混入原料中而不被发现。 * * * * * * * * * * * * * 分光光度计在更换光源灯、重新安装、搬运或检修后，或是仪器工作不正常时，都要进行波长校正。正常工作的仪器每隔一个月也要检查一次波长，必要时进行校正。校正波长是为了检验波长刻度与实际波长的符合程度，并通过适当方法进行修正，以消除因波长刻度的误差引起的吸光度测定误差，提高测定的准确性和灵敏度。 3) 显色温度及显色时间 (CM、