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青霉素的制备 2)球状菌培养工艺流程 球状菌菌种 亲米孢子 生产米孢子 种子液 发酵液 2)球状菌:首先由冷冻管孢子接入混合有0.5-1.0%玉米浆的摇瓶培养原始亲米孢子,再接入大米茄子瓶生产大米孢子,两者都是在25度下静置培养10天可收获。保存在5度冰箱。种子培养:冷藏10天以内的生产米,接入种子罐(花生饼粉、玉米胚芽粉、葡萄糖、饴糖)28度培养50-60h,当PH降为5.5-5.0,菌丝呈菊花团状,平均直径在100-130微米,每毫升球菌数6万-8万只,沉降率在85%以上,可用。接入发酵罐。 1.工业钾盐生产工艺流程 发酵液 一次滤液和其余发酵液 二次滤液 一次丁酯萃取液 缓冲液萃取液 二次丁酯萃取液 脱色脱水液 结晶液 青霉素钾湿结晶体 洗涤后湿晶体 过筛颗粒 干燥粉末 青霉素钾成品 2.青霉素钠盐制备(共沸蒸馏结晶) 发酵液 二次丁酯萃取液 脱色二次丁酯萃取液 青霉素钠盐水萃取液 结晶液 青霉素钠盐湿结晶 洗后湿结晶 干燥粉末 青霉素钠盐成品 3)精制 脱色脱水:活性碳脱色;冰冻脱水法,用冷盐水降温至-18--- -20度,水结冰析出。 青霉素钾盐结晶:青霉素丁酯二次提取液中,加入醋酸钾乙醇溶液,青霉素钾盐结晶析出。 青霉素钠盐:A、从二次丁酯萃取液中直接结晶,加入醋酸钠乙醇溶液。 B、共沸蒸馏结晶:0.5mol/L浓度的NaOH溶液、在PH6.4-6.8下萃取,得到青霉素钠的水萃取液,浓度为15*104--25*104U/ml。然后加入2.5倍体积的丁醇,在16-26度、5-10mmHg下蒸馏,当浓缩到原来水萃取液体积时,停止蒸馏,有钠盐析出。 * * (A)、理化性质: 1、溶解性:受pH影响 游离酸:易溶于有机溶剂,难溶于水 盐:易溶于水,几乎不溶于有机溶剂,当有机溶剂中含少量水时,溶解度增大。 2、酸碱性:有机弱酸 3、稳定性:干燥纯净的盐固体稳定;纯有机溶剂溶液稳定;遇酸碱易分解;в-内酰胺环易为亲核或亲电试剂作用而打开失活;青霉素的水溶液不稳定。 温度、pH对其稳定性的影响 --------------------------------------------- 4降解反应 5、聚合反应 氨苄青霉素在水溶液中易形成聚合物,是氨苄青霉素过敏反应的主要过敏原之一。 6、过敏反应 可能为青霉噻唑多肽和青霉噻唑蛋白 (B)、制备工艺 1、菌种 最早的原始菌种是点青霉菌(Penicillium notatum); 现用产黄青霉菌(Pen.chrysogenum) 按菌丝的形态分为丝状菌(黄孢子和绿孢子)和球状菌(绿孢子和白孢子)两种。 国内青霉素生产厂大都采用绿色丝状菌,有的厂家用白孢子球状菌。 2、发酵工艺流程 1)丝状菌发酵工艺流程 大米茄子瓶 (亲米孢子培养) 亲米锥形瓶 25度,6-8d 冷冻管 (生产米孢子培养) 大米茄子瓶 25度,8-10d 种子罐培养 种子罐 28度,50-60h,1.5v/(v*min) 发酵罐培养 发酵罐 26度,PH6.7-
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