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如何提取蝎毒?
蝎毒又称蝎子毒,是从蝎子尾部提取的天然生物毒素。蝎毒的药效是全蝎的18倍,研究表明:蝎毒主要由非蛋白质部分和蛋白质部分组成。非蛋白质部分中主要由50-70种氨基酸组成,其中含有人体必需的氨基酸17种,而蝎毒中的主要成分为具有药理活性的蛋白质。可通过解剖、机械刺激、弱电刺激三种进行采集和提取。对神经系统、消化系统、心脑血管系统、癌症、皮肤病等多种疾病,以及对人类危害极大的各种病毒均有预防和抑制作用。
一、蝎毒来源:
我国境内蝎子的种系属东亚钳蝎,东亚钳蝎主要三个种系分别是东全蝎、主薄蝎、天蝎。
东全蝎:产于山东临沂、安徽、河北等地。体大、肚满、背色黑、腹青褐色,喜微酸性土壤,喜食昆虫,产仔多,母性较差,药性一般。
主薄蝎:产于我国长江以南。江南原无蝎,唐朝开元初年,有位叫杜伯的全薄,用竹筒盛蝎子过江,蝎子从竹筒中跑了出来,以后江南一带蝎子也叫“杜伯蝎”或“主薄蝎”。药性较弱。
天蝎:又称为会全蝎,产于伏牛山山区的河南南阳地区、平顶山地区、湖北襄樊地区等。伏牛山处于我国温暖带向亚热带的过渡带,气候适宜,山峰奇秀,瀑布众生,属弱碱性土壤,是我国天然药材宝库。伏牛山天蝎肚瘪、背色黑、腹部多呈黄绿色,喜碱性土壤,产仔较多,母性好,喜食蜈蚣,毒性好,药用价值最高,中外驰名。伏牛山天蝎多系清水加工成“淡水全虫”。其盐分少,是蝎子中的极品。北宋以来,作为上乘药材进贡朝廷,誉为“天下第一蝎”,盛名中外。
此外,还有十腿蝎、藏蝎、斑蝎。十腿蝎主要产自伏牛山浙川县,目前已近绝迹;藏蝎产自西藏;斑蝎产自台湾。
二、伏牛山天蝎的采集:
1.采毒对象
一般说来,生长发育正常的成年蝎都可进行采毒。雌蝎毒量多些,雄蝎少些,不过应注意临产孕蝎严禁采毒,否则仔蝎成活率太低。
2.采毒季节
采毒只能在适宜蝎生长发育的季节进行。以温度指标来说,一般以25℃~39℃为采毒的最佳温度,20℃以下不宜采毒,在冬眠期间更不能采毒,否则可能导致蝎的死亡。
3.采集方法
蝎子在受到激怒的情况下,出于防御或攻击的本能,会从毒囊中排出毒液。据此,采集蝎毒常用的方法有以下三种: 1 解剖取毒法:一手用镊子夹住蝎子的后腹部第五节的两侧,一手用剪刀剪下蝎子的尾节,破碎后浸入生理盐水中,浸出有毒部分,集中有毒的液体,放入容器内,再制成干毒粉,置于-5℃下保存备用。这种采毒法,每条蝎子只能采毒一次,而且采毒后的蝎子降低了药用功能和经济价值,对蝎子的伤害太大,所以一般不采用此法。 2 机械刺激取毒法:用金属钳夹着蝎一个螯肢 蟹状钳 ,注意不要夹破其肢,提起悬于容器中片刻,多数蝎子的尾刺即会排出毒液,但也有少数蝎子不排毒液的,不排毒液的可用细木筷子轻轻碰撞蝎子的头胸部或前腹部,激起蝎子的尾刺排毒。 3 弱电刺激取毒法:使用药理生理实验多用仪取毒,把频率调到128h,用压调到6~10伏,用一个电板夹住蝎任一个前螯,再用一个金属夹蝎尾第二节,将另一电极不断接触金属镊子,如还不排毒,可用生理盐水将电板与蝎体接触处弄湿,即能刺激排毒。此法采毒量大,工效高,一人操作,全年多次采毒而不致于损害蝎子,是中国目前较先进而科学的采毒方法。
4.采毒周期
在电脉冲的刺激下,每采一次毒都基本上使毒腺中的毒液排空。新合成毒液涉及蝎体内一系列生物化学过程,这一过程所需的时间就是采毒期,一般要7~20天左右。
注意事项:
采毒后的蝎行动迟缓,捕食能力下降,但食欲增大。因此,采毒后,应将蝎放在温湿条件适宜的地方,先让其自然恢复;待其能正常活动后,应投放一些体小多汁的幼虫 因捕食能力下降,不能吃老龄体大的虫子 供其采食;由于蝎被采毒后食欲大增,故白天也应投放一定量的食物。
三、蝎毒的提取:
蝎毒活性肽生物制剂是在提取伏牛山天蝎蝎毒基础上,经过超滤,膜过滤,离子交换层析、疏水、反相层析等,重组DNA技术获得。
1.超滤:又称超级过滤,即将蝎毒用生理盐水化开,经过超滤膜,超滤膜只能通过分子量6300~9000道尔顿之间,把不溶于水的粘蛋白和大分子过滤掉,只留小分子十几个氨基酸组成的活性肽。
2.膜过滤:再次通过最细密的膜过滤,只有离子和小分子物质可以通过。
3.离子交换层析:通过离子树脂阴阳离子交换,把蝎毒中对人体有毒性的类神经毒素去除掉。
4.疏水:蛋白质表面一般有疏水与亲水基团,疏水是利用蛋白质表面的疏水性,把一部分没活性的疏水蛋白分离掉。
5.反相层析:经过反相层析,使分子量不同的蝎毒活性肽分层提取获得提纯的蝎毒生物活性肽、抗癌多肽、血管多肽、神经生长肽、护肝多肽等。
蝎毒活性多肽娇嫩在正常空气下,易氧化,必须采用先进的β-环糊精包裹技术,把蝎毒活性多肽包裹起来,阻止氧化,增加稳定性。
蝎毒活性多肽的提取十分不易,整个周期需要
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