基因工程期末复习2.docVIP

1、生物技术：（biotechnology），是指人们以现代生命科学为基础，结合其他基础科学的科学原理，采用先进的科学技术手段，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的 生物技术是现代生物学发展及其与相关学科交差融和的产物，其核心是以DNA重组技术为中心的基因工程，还包括微生物工程、生化工程、细胞工程及生物制品等领域 （genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，基因工程的三大关键元件? 基因（供体）：外源基因、目的基因? 载体：能将外源基因带入受体细胞，并能稳定遗传的DNA分子。 ?宿主（受体）：，能摄取外源DNA、并能使其稳定维持的细胞（组织、器官或个体）。? 产生出人类需要的基因产物，或者改造、创造新的生物类型。 1）跨物种性：外源基因到另一种不同的生物细胞内进行繁殖。 2）无性扩增：外源DNA在宿主细胞内可大量扩增和高水平表达。①不同基因具有相同的遗传物质基础②基因是可以切割的③基因是可以转移的 ④多肽与基因之间存在着对应关系 ⑤遗传密码是通用的 ⑥基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代 一、取得符合人们要求的DNA片段，这种DNA片段被称为“目的基因”； 二、构建基因的表达载体； 三、将目的基因导入受体细胞； 四、目的基因的检测与鉴定。 4.基因工程的基本步骤? （1）目的基因的获取：从复杂的生物基因组中，经过酶切消化或PCR扩增等步骤，分离出带有目的基因的DNA片断。?? （2）重组体的制备：将目的基因的DNA片断插入到能自我复制并带有选择性标记的载体分子上。?? （3）重组体的转化：将重组体（载体）转入适当的受体细胞中。??（4）克隆鉴定：挑选转化成功的细胞克隆。?? （5）目的基因表达：使导入寄主细胞的目的基因表达出我们所需要的基因产物（－）真核基因组结构庞大 （二）单顺反子 （三）重复序列 （四）基因不连续性 Central dogma of molecular biology ）：①从DNA流向DNA（DNA自我复制）；②从DNA流向RNA，进而流向蛋白质（转录和翻译）；③从RNA流向RNA（RNA自我复制);④从RNA流向DNA（逆转录） 注：其中前两条是中心法则的主要体现，后两条是中心法则的完善和补充 常指新合成多肽链中用于指导蛋白质的跨膜转移(定位)的N-末端的氨基酸序列host cell）：接受移植物的细胞和在基因工程技术中接受DNA重组体并为重组体进行扩增(克隆)提供原料、条件和场所的细胞，①易于接纳外源DNA；②无特异的内源核酸内切酶；③载体复制、扩增不受阻；④与载体有互补性。1.限制性缺陷型——外切酶和内切酶活性缺陷?2.?重组整合缺陷型——用于基因扩增或高效表达的受体细胞 3.?具有较高的转化效率?4.?具有与载体选择标记互补的表型?5.?感染寄生缺陷型——防止重组细菌扩散污染，生物武器除外。?（promoter）（Shine-Dalgarnosequence）：位于翻译起始密码子上游的6-8个核苷酸序列。(terminator T)：是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。（ initiation codonm）信使核糖核酸分子中规定编码多肽链第一个氨基酸的密码子。 (tumor-inducing)：在根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种染色体外自主复制的环形双链DNA分子 28、T-DNA区（transferred-DNA?regions）（Enhancer）位Silencer）(attenuator) :RNA合成终止时，起终止转录信号作用的那段DNA序列(operon):指启动基因、操纵基因和一系列紧密连锁的结构基因的总称