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S0PZL09QC00502福林酚测定标准操作规程
1 目的
建立福林酚测定法，保证蛋白质含量检查有章可循。
2 范围
适用于福林酚测定法的标准操作。
3 内容
3.1制定依据附录第页u2+螯合形成蛋白质-铜复合物，此复合物使酚试剂的磷钼酸还原，产生蓝色化合物，同时在碱性条件下酚试剂易被蛋白质中酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸还原呈蓝色反应。在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。
3.2.2 本法灵敏度高，测定范围通常可达20～250。本法干扰物质较多，对双缩脲反应产生干扰的离子，同样容易干扰福林酚反应，且影响还要大。还原物质、酚类、枸橼酸、硫酸铵、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。
3.3 试药
氢氧化钠、碳酸钠、酒石酸钾、硫酸铜、钨酸钠、钼酸钠、磷酸、硫酸锂、 盐酸、溴
3.4 仪器
恒温水浴箱
3.5 用具
具塞试管
3.6 试液
详见《试液与试纸配制标准操作规程》
3.7 操作法
3.7.1 对照品溶液的制备
取牛血清白蛋白对照品，加水溶解并制成每1ml中含0.2mg的溶液。
3.7.2 供试品溶液的制备
照各品种项下规定的方法制备（蛋白质浓度应与对照品溶液基本一致）。
3.7.3 测定法
精密量取对照品溶液0.0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml 对照品溶液取用量可在本法测定范围内进行适当调整 ，分别置具塞试管中，各加水至1.0ml，再分别加入碱性铜试液1.0ml，摇匀，室温放置10分钟，各加入福林酚试液[取福林试液中的贮备液（2mol/L酸浓度）1→16]4.0ml，立即混匀，室温放置30分钟，照《紫外-分光光度法标准操作规程》在650nm的波长处测定吸收度；同时以0号管作为空白。以对照品溶液浓度与其相对应的吸光度计算线性回归方程。另精密量取供试品溶液适量，同法测定。从线性回归方程计算供试品溶液中的蛋白质浓度，并乘以稀释倍数，即得。
4 附件
无变更历史
变更后版本号 变更原因 变更批准日期 SOP·ZL·09·QC·005·01 SOP·ZL·09·QC·005·02 执行2015年版药典 2015年10月30日 福林酚测定法标准操作规程 文件编码：SOP·ZL·09·QC·005·02
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