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进行期银屑病患者皮中胰岛素样生长因子Ⅰ受体蛋白与mRNA的表达.docx
进行期银屑病患者皮损中胰岛素样生长因子Ⅰ受体蛋白与mRNA的表达
进行期银屑病患者皮损中胰岛素样生长因子Ⅰ受体蛋白与mRNA的表达
中华皮肤科杂志 1999年第6期第32卷 论著
作者:肖征 高进 王椿森 胡长发
单位:肖征 高进 胡长发 430022武汉,武汉市第一医院皮肤病研究室;王椿森 同济医科大学附属协和医院皮肤科
关键词:银屑病受体,胰岛素样生长因子ⅠRNA,信使
【摘要】目的 探讨胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGFⅠR)和进行期银屑病的关系。方法 应用免疫组织化学技术,逆转录酶聚合酶链反应和原位杂交分别检测15例银屑病患者和10例正常人皮肤组织块中IGFⅠR蛋白与mRNA的表达。结果 IGFⅠR蛋白与mRNA表达在银屑病患者基底层和棘细胞层,IGFⅠR蛋白与mRNA相对积分光密度值在正常对照组与银屑病组间存在极显著性差异(P<0.01)。结论 进行期银屑病患者皮损中表达增加的IGFⅠR蛋白和mRNA可能介导了角质形成细胞的增殖与分化不全。
胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-likegrowthfactorⅠ,IGFⅠ)是胰岛素家族中的一员,由生长激素(growth hormone,GH)诱导分泌,IGFⅠ负反馈作用于GH,构成GH?IGF轴,此轴通过IGFⅠR作用于角质形成细胞。我们应用蛋白与基因检测技术检测了IGFⅠR蛋白与mRNA在进行期银屑病患者中的表达。
Expression of Insulin? like Growth Factor
Ⅰ Receptor Protein and mRNA in Active Psoriasis
XIAO Zheng* , GAO Jin, WANG Chunsen, et al.*
The Investigative Laboratory of Dermatology,First Hospital of Wuhan,430022
【 Abstract】 Objective To study the relationship between insulin-like growth factor Ⅰ receptor(IGFⅠ R)and active psoriasis.Methods The skin biopsies from active psoriatic lesions in fifteen cases with psoriasis and ten normal persons were investigated by immunohistochemical technique,RT-PCR and in situ hybridization.Results The expressions of IGFⅠ R protein and mRNA were located on the basal cell layers and prickle cell layers.There was significant difference of mRNA expression between the normal and psoriatic groups(P<0.01).Conclusion The increased expression of IGFⅠ R protein and mRNA may mediate the hyperplasia and parakeratosis of keratinocytes in active psoriasis.
【 Key words】 Psoriasis Receptors,insulin-like-growth factorⅠ RNA,messenger
材料与方法
1.病例:寻常型进行期银屑病患者15例,经临床与组织病理检查确诊,其中男7例,女8例,年龄13~67岁。取患者典型皮损活检。正常人皮肤组织块标本10份,均源于外科整形手术,男女各半,年龄与银屑病组匹配。所有标本一分为二,一块经10%福尔马林固定,石蜡包埋,连续切片4μm;另一半经0.25%胰蛋白酶4℃消化过夜,置37℃0.5h,用镊子小心分离表皮真皮,置于经DEPC处理过的Eppendorf管,液氮罐中保存备用。
2.免疫组织化学:兔抗人IGFⅠR多克隆抗体(美国SantaCruz公司),SP试剂盒(美国Zymed公司)。具体步骤为切片常规脱蜡至水,3%H2O2灭活内源性过氧化物酶,滴加10%羊血清,滴加IGFⅠR多克隆抗体(1∶40)4℃过夜,滴加生物素标记二抗37℃孵育20min,滴加HRP标记的链霉亲和素,DAB显色,苏木素轻度复染,脱水,透明,中性树脂封片。
3.逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR):表皮、真皮组织中总RNA的提取按Chomczynsk
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