氯化镍对雏鸡脾脏免疫功能影响研究.pdfVIP

本研究受四川农业大学 学科双支计划资助 万方数据 摘 要 本研究选用1日龄艾维茵肉鸡(AA)健雏240只，随机分成4组，分别饲以对 照日粮和高镍日粮(高镍I组：300 mg／kg，高镍II组：600 mg瓜g，高镍III组：900 mgg， 镍源：氯化镍，NiCl2)，自由饮水，饲喂42天。采样时间为14，28和42日龄。以 实验病理学、TUNEL、流式细胞术、荧光定量PCR和ELISA等方法研究日粮中添加 不同水平氯化镍对雏鸡脾脏免疫功能的影响。结果如下： 1．与对照组比较，高镍组雏鸡体重增长减慢，脾脏体积减小、重量减轻。白髓中淋 巴细胞数量减少；超微结构观察可见内质网扩张和核膜扩张，凋亡细胞增多。 2． 脾脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH．Px) 活性显著降低(尸0．05或P0．01)，谷胱甘肽(GSH)含量显著降低(尸0．05或 P0．01)，丙二醛(MDA)含量显著升高(尸0．05或P0．01)，抑制羟自由基能 力下降(尸0．05或P0．01)。 3．TUNEL染色结果与流式结果显示，脾脏淋巴细胞凋亡数量和凋亡率显著升高 (尸O．05或P0．01)，凋亡蛋白Bax、Bcl．2和Caspase．3 mRNA表达水平和含量 显著下降(尸0．05或P0．01)。 4．流式细胞术检测结果显示，CD3+、CD3+CD4+幂[I CD3+CD8+T淋巴细胞百分率 不同程度下降，CD4+／CD8+L卜,例降低。IgA+B细胞数量显著减少(尸0．05或 PO．01)。 5．脾脏白细胞介素(interleukin IL，IL一2、IL一6、IL．10、IL．12)，肿瘤坏死因子0c(Tumor necrosis factor，TNF—a／LITAF)，干扰素Y(Interferon，IFN．Y)mRNA表达水平和 含量均显著下降(尸O．05或P0．01)，免疫球蛋白(immunoglobulin Ig，IgA、IgG、 IgM)含量显著降低(尸O．05或P0．01)。 6．实时荧光定量PCR(Quantitative real．time polymerase chain reaction)结果表明： Toll样受体(Toll—like receptor TLR，TLR4和TLR7)的基因表达水平均显著下调 (P0．05或P0．01)。 研究结果表明日粮中氯化镍超过300 mg／l(g时脾脏会发生以下变化：@SOD、 CAT、GSH．Px活性下降，GSH含量减少，抑制羟自由基能力下降，MDA含量显著 上升，引起脾脏氧化损伤；②镍的摄入引起脾脏淋巴细胞膜结构受损，凋亡细胞增多， 造成脾脏的生长发育和免疫功能受损；③细胞因子(IL一2、IL一6、IL．10、IL．12、 TNF．odLITAF、IFN—Y)mRNA表达下调、含量降低，CD4+禾N CD8+T淋巴细胞比例 下降，表明T淋巴细胞数量减少和功能受损，细胞免疫功能受到抑制；@IgA+B细 胞数量减少及IgA、IgG、IgM含量降低，表明B淋巴细胞和体液免疫功能受损；⑤ TLR4和TLR7 mRNA表达下调，表明脾脏非特异性免疫受到影响。 关键词：氯化镍；荧光定量PCR；流式细胞术；mRNA表达；细胞凋亡；免疫损伤 万方数据 The Effects of Nickel Chloride on Splenic Immune Function in Broilers Jianying Huang(Basic Veterinary) Directed by：Professor Hengmin Cui Abstract：Two hundred and forty avian broilers were randomly divided into four groups． Broilers were provided with a control diet(corn—bean basal diet)or diets supplemented with 3 00，600 and 900 mg／kg nickel chloride(NiCl2)，and were supplied with water and afore．mentioned diets ad libitum for 42 days．Samples were gotten at 1 4，28 and 42 days of age of the experiment．This study was conducted to observe the effects of NiCl2 on splenic immune function in broiler by methods