实验二聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)分离血清.pptVIP

实验二 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS)分离血清蛋白质 目的 1 强化学生对电泳基本原理的理解与记忆。 2 熟记聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的基本原理、学会操作。 原理 带有电荷的颗粒在电场中泳动的现象叫电泳。带正电荷的泳向负极，带负电的泳向正极。许多生物分子都带有电荷，其电荷的多少取决于分子性质及其所在介质的pH及其组成。混合物中各组分在电场中的泳动速度，首先和本身所带的净电荷多少、分子量大小和形状有关。一般来说，带电越多，分子量（颗粒）越小而且是球形的，则泳动速度就快。反之，则慢。因此，在一定时间内，由于各组分移动距离的不同，而达到分离鉴定各组分的目的。 区带电泳的分类 1．按支持物物理性状不同，可分为： (1)滤纸及其他纤维素膜如乙酸纤维膜、玻璃纤维膜、聚胺纤维膜电泳。 (2)粉末电泳，如纤维素粉、淀粉、玻璃粉电泳。 (3)凝胶电泳，如琼脂糖、琼脂、硅胶、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳。 (4)丝线电泳，如尼龙丝、人造丝电泳。 2．按支持物的装置形式不同，可分为： (1)平板式电泳，支持物水平放置，是最常用的电泳方式。 (2)垂直板式电泳。 (3)连续流动电泳，首先应用于纸电泳，将滤纸垂直竖立，两边各放一电级，缓冲液和样品自顶端下流，与电泳方向垂直。可分离较大量的蛋白质。以后有用淀粉、纤维素粉、玻璃粉等代替滤纸，分离效果更好。 3．按pH的连续性不同，可分为： (1)连