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2.1实验检测有机物season详解
实验2 检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 1.实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。 (1)还原糖+斐林试剂 (2)脂肪+ (3)蛋白质+双缩脲试剂 (4)淀粉+碘液→ 水浴加热 镜检 苏丹Ⅳ染液 镜检 苏丹Ⅲ染液 紫色 砖红色沉淀 红色 蓝色 橘黄色 2.实验流程 (1)还原糖的鉴定 (2)脂肪的鉴定 取材:花生种子浸泡3~4 h,将子叶削成薄片 观察:在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒 然后用高倍镜观察 结论:脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色 ①取最理想的薄片 ②在薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ染色 2~3 min ③去浮色 ④制成临时装片 制片 (3)蛋白质的鉴定 (4)淀粉的检测与观察 实验注意问题 1.实验材料的选择 (1)还原糖鉴定实验材料要求 浅色:不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料。 还原糖含量高:不能用马铃薯(含淀粉)、 甘蔗、甜菜(含蔗糖) (2)脂肪的鉴定实验中,实验材料最好选富含脂肪的种子。 (3)蛋白质的鉴定实验中,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋的蛋清。 (3)唯一需要显微镜——脂肪鉴定。 (4)记准混合后加入——斐林试剂;分别加入——双缩脲试剂(先加A液,后加B液,且B液不能过量)。两者成分相同,但CuSO4的浓度不同,所以不能混用。 ( 5)非还原糖(如蔗糖)+斐林试剂 现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。 辨析比较 斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析 比较项目 斐林试剂 双缩脲试剂 不 同 点 使用方法 呈现反应条件 反应原理 颜色 浓度 相同点 都含有NaOH、CuSO4两种成分,且所用NaOH浓度都是0.1 g/mL 甲液和乙液混合均匀后方可使用,且现配现用 砖红色 肽键化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物 还原糖中的醛基被 Cu(OH)2 氧化, Cu(OH)2被还原为Cu2O 不需加热即可反应 需水浴加热 使用时先加A液再 加B液 B液CuSO4浓度为 0.01 g/mL 乙液CuSO4浓度为 0.05 g/mL 紫色 1.连线 苏丹III染液 豆浆 砖红色沉淀 斐林试剂 马铃薯汁 橘黄色 双缩脲试剂 葡萄汁 蓝色 碘液 花生子叶 紫色 纠正训练 1.下列关于实验操作步骤的叙述中,正确的是 ( ) A.用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可 直接用于蛋白质的鉴定 B.脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被 染成橘黄色的脂肪滴 C.鉴定还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇匀 后,再加入乙液 D.用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混 合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现 配现用 解析 本题在于考查学生的操作是否规范、正确,是否注意了不同鉴定实验之间的差别。在选用试剂上容易出现错误。斐林试剂与双缩脲试剂所用溶质相同,且所用氢氧化钠溶液的浓度相同,但二者所用的硫酸铜的质量浓度不同。鉴定还原糖时,是甲、乙两液现配现用,一次加入;而鉴定蛋白质A时要先加A液,再加B液。还原糖、蛋白质的颜色反应是试剂与其发生化学反应的结果,是肉眼可见的。脂肪的鉴定中,由于脂肪滴小且分散在细胞中,所以需要借助于显微镜观察。 答案 B 2.生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是 ( ) A.只有脂肪的鉴定需要使用显微镜 B.用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热 C.使用斐林试剂最好是现配现用 D.在还原糖的鉴定中,可用酒精灯直接加热产生 砖红色沉淀 解析 生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定,是根据与某种试剂产生的特定的颜色反应进行的。在题目给出的选项中,还原糖的鉴定需要加斐林试剂,同时还要水浴加热,但并不能直接加热产生砖红色沉淀。 D 题组三:物质鉴定类实验 5.(经典高考题)将小麦种子分别置于20℃和30℃培养箱中培养4天,依次取等量的萌发种子分别制成提取液Ⅰ和提取液Ⅱ。取3支试管甲、乙、丙,分别加入等量的淀粉液,然后按下图加入等量的提取液和蒸馏水,45℃水浴保温5分钟,立即在3支试管中加入等量斐林试剂并煮沸2分钟,摇匀观察试管中的颜色。结
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