细胞工厂的构建及应用概念.pptVIP

构建微生物细胞工厂的技术路线 正丁醇合成途径 正丁醇合成途径的优化 在正丁醇合成途径基础上，敲除了竞争途径基因(ldhA、adhE、frdBC 和pta) 来提高丁醇产量，并过表达甲基营养酵母(Candida biodinii) 的甲酸脱氢酶基因(fdh) 提高还原力供给。 利用该技术思路也可合成其他长链醇。正丁醇途径中产生的丁酰CoA 和酰基CoA 经过再一轮的缩合( 反向β- 氧化)、还原、脱水和再还原形成正己醇，如此反复，以+2 方式形成各种长链醇。 异丁醇合成途径的创建及优化 首先，在大肠杆菌中引入乳酸乳球菌(Lactococcus lactis) 的酮酸脱羧酶基因(KivD) 和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的醇脱氢酶基因(adh)，创建出异丁醇合成途径。 在此基础上，过表达芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 的乙酰乳酸合成酶基因(alsS)、大肠杆菌自身的乙酰羟酸还原异构酶基因(ilvC) 和二羟酸脱水酶基因(ilvD)，并敲除竞争途径相关基因醇脱氢酶基因(adhE)、乳酸脱氢酶基因(ldhA)、富马酸还原酶基因(frd)、磷酸乙酰转移酶基因(pta)、丙酮酸甲酸裂解酶基因(pflB) 和转录调控因子(fnr)，来提高异丁醇合成途径的效率。 通过无痕基因表达调控技术，对异丁醇合成途径进行了精确调控，构建出了组成型稳定生产异丁醇的