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应用微生物学 ——胞苷 11级生物技术 20112513606 王国辉 胞苷 ？ 中文别名： 胞嘧啶核苷 英文名称： Cytidine 构成核酸的嘧啶核苷之一。由胞嘧啶（碱基部分）和核糖（糖部分）组成。 物理性质 白色结晶性粉末。有吸湿性。溶于水、酸和碱，不溶于有机溶剂。熔点220～230℃(分解)。比旋光度［α］25D＋31°(c=0.7，水中)。最大吸收波长(pH 8.2) 271nm(ε9100)、(pH 2.2) 280nm(ε13400)。 主要用于急性颅脑外伤和脑手术后的意识障碍 胞苷作为嘧啶核苷，主要用于生产抗肿瘤 抗病毒药物的中间体，是制造阿糖胞苷 、环 胞 苷、三磷酸胞苷 、胞二磷胆碱等药物的主要原料。 随着抗病毒、抗肿 瘤、治 疗艾滋病药物研制的深入 ，对天然嘧啶核苷的需求量加大，人们期望得到廉价的能大规模生产胞苷的工艺方法。 知识拓展 脱氧核糖核苷酸与核糖核苷酸 脱氧核苷酸是基因(DNA)的基本结构和功能单位，决定生物的多样性的就是脱氧核苷酸中四种碱基:腺嘌呤（缩写为A），胸腺嘧啶（缩写为T），胞嘧啶（缩写为C）和鸟嘌呤（缩写为G）的排列顺序不同。 RNA由核糖核苷酸经磷酯键缩合而成长链状分子。RNA的碱基主要有4种，即A腺嘌呤，G鸟嘌呤，C胞嘧啶，U尿嘧啶。其中，U（尿嘧啶）取代了DNA中的T（胸腺嘧啶）而成为RNA的特征碱基。 嘧啶核苷的生产方法 嘧啶核苷的生产方法主要 有： 1.传统的嘧啶核苷生产方法是使用RNA经化学方法水解 RNA化 学 水 解法 和 发 酵 法 。 RNA 水解 A腺嘌呤 G鸟嘌呤 C胞嘧啶 U尿嘧啶 2 发酵法 1氨甲酰磷酸合成酶P 2天冬氨酸氨甲酰转移酶 3二 氢乳酸酶 4二氢乳酸脱氢酶 5乳清 酸 磷 酸 核 糖 转移酶 6乳 清 酸 脱 氢 酶 7尿 苷 酸 激 酶 8胞 三 磷 合 成 酶 9 5-核苷酸酶 10胞苷脱氨酶 11尿 苷 磷 酸 化 酶 12尿嘧啶磷酸核糖基转移酶 枯草芽孢杆菌的从头合成 UMP是通过6个酶依次催化完成的 .编码这些酶的pyr基因的表达受到过量的尿嘧啶阻遏,并表现出协同调节.另一方面,对这些酶的反馈抑制或反馈激活调节主要集中在第一个UMP合成酶,即天冬氨酸氨甲酰磷酸合成酶 (CPSase).总之,UMP生物合成酶的合成受到尿苷化合物的阻遏 ,同时可被胞苷核苷酸 和PRPP(焦磷酸核糖)激活,而CTP合成 酶的合成受到胞苷化合物的阻遏 ,不受尿苷核苷酸的抑制.因此,可首先通过诱变得到一株胞苷产生菌枯草芽孢杆菌,其遗传标记为5-氟胞苷抗性(5-FCr),3-脱杂氮尿嘧啶抗性(3-DUr).再采用同源重组的方法敲除该菌染色体上的胞苷脱氨酶(cytidine deaminase)基 因cdd,构建出遗传稳定的胞苷脱氨酶缺失株,以进一步提高胞苷产量. 目前我国胞苷工业化生产还存在着 一 些问题:(1)产苷低:国内尚无发酵法生产胞苷的报道,而胞苷在国外已经实现工业化生产,产苷水平已达到30.2g/L;(2)重组菌株的遗传改造:重组菌株在发酵培养基中的稳定性以及工程菌工业化生产的可行性研究;(3) 提取分离成本高:寻找最佳的提取途径以降低成本.解决目前存在的问题,对于实现国内胞苷产业化,促进医药行业的发展有重要的意义.因此,今后的任务是利用微生物遗传育种技术,根据代谢调控育种的原理,选育出高产稳定的胞苷生产菌株. 结语