9第九章基因工程和基因组学
基因工程的基本过程: 目的基因的制备 载体的制备 目的基因与载体的连接 重组DNA分子导入宿主细胞 含目的基因细胞的筛选和鉴定 基因工程(gene engineering)也称为遗传工程(genetic engineering)、基因操作(gene manipulation)、DNA重组技术(recombination DNA techniques)。有时人们还称它为基因克隆(gene cloning)或分子克隆(molecular cloning)。 DNA重组: 不同来源的DNA分子通过磷酸二酯键连接而形成重新组合的DNA分子的过程,称为DNA重组(DNA recombination)。 二 限制性内切核酸酶 1、限制性内切核酸酶的命名: 命名规则: 用来源细菌的英文缩写斜体符号命名。它的第一个字母大写,代表细菌的属名;第二、三字母小写,代表细菌的种名;第四个字母代表菌株;最后用罗马字母表示同一菌株中不同限制酶的编号。 2、限制性酶分类. Ⅰ限制酶:通常在识别位点下游100~1000bp处切割DNA,切割位点难以预测。每隔一段DNA序列随机切断双连DNA分子,没有序列特异性. Ⅱ限制酶:在识别位点切割DNA,切割位点固定,序列可知。 Ⅲ限制酶:在识别位点附近切割DNA,切割位点难以预测。 3、切割方式: 交错切割DNA 双链,产生两个相同的单链黏性末端(sticky e
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