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《DNA重组技术的基本工具》练习 1．EcoRI和SmaⅠ限制酶识别的序列均由6个核苷酸组成，但切割后产生的结果不同，其识别序列和切割点（图中箭头处）分别如下图所示，请据图分析正确的是 A．所有限制酶的识别位点均由6个核苷酸序列组成 B．SmaⅠ限制酶切割后产生的是黏性末端 C．用连接酶连接平末端和黏性末端的连接效率一样 D．细菌细胞内限制酶可以切割外源DNA，防止外源DNA入侵 2．现有一长度为3000碱基对 bp 的线性DNA分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图1。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。该DNA分子的结构及其酶切图谱是 3.下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是 A.①②③④ B.①②④③ C.①④②③ D.①④③② 4.下表为常用的限制酶及其识别序列和切割位点。根据表推断下列叙述，正确的是 限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHI G↓GATCC KpnI GGTAC↓C EcoRI C↓AATTC Sau3AI ↓GATC HindⅡ GTY↓RAC SmaI CCC↓GGG 注：Y C或T,R A或G 限制酶切割后不一定形成粘性末端 B.限制酶的切割位点一定在识别序列的内部 C.不同限制酶切割后形成的粘性末端不同 D.一种限制酶只能识别一种核苷酸序列 5．已知某限制性核酸内切酶在一环状DNA分子上有3个酶切位点，如右下图所示。现有多个上述环状DNA分子，如果每个DNA分子上至少有l个酶切位点被该酶切断，从理论上分析，产生不同长度的DNA片段最多有（ ） A．6种 B．7种 C．8种 D．9种 6．（多选）某致病基因h位于X染色体上，该基因和正常基因H中的某一特定序列BclI酶切后，可产生大小不同的片段（如图1，bp表示碱基对），据此可进行基因诊断。图2为某家庭病的遗传系谱。 下列叙述正确的是 A h基因特定序列中Bcl 1酶切位点的消失是碱基序列改变的结果 B II-1的基因诊断中只出现142bp片段，其致病基因来自母亲 C II-2的基因诊断中出现142bp，99bp和43bp三个片段，其基因型为XHXh D II-3的丈夫表现型正常，其儿子的基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2. 7．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，、中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： （1）一个图1所示的质粒分子经Sma切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。 （2）若对图中质粒进行改造，插入的Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。 （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma 切割，原因是 （）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。（）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图 1 kb 即1000个碱基对 ，请画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。 2