需氧芽胞杆菌汇编.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 鉴定试验： 形态和菌落特征 生化试验:表 串珠试验: 将待检菌株接种在含0.05～0.5 IU/ml青霉素的培养基上，37℃ 6h，炭疽杆菌可发生形态变化，形成大而均匀的圆球体，且成串珠状排列 --类炭疽杆菌无此现象 --与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关 * 炭疽芽胞杆菌 * * 青霉素抑制试验：某些芽胞杆菌也能受到抑制，不是特异性试验，应结合其他试验 接种于含青霉素5、10、100 IU/ml普通琼脂平板， 37℃24h 生长 受抑制不生长 串珠和青霉素抑制联合试验： ２％兔血清琼脂平板 抑菌环 青霉素纸片 炭疽芽胞杆菌 新鲜培养物0.1ml涂布于２％兔血清琼脂平板,贴1U/片青霉素纸片37℃2-3h,平板在低倍镜下,纸片周围有一无菌生长的抑菌环, 抑菌环外周药物浓度低,菌体细胞壁受损呈串珠状,8-12h后,测抑菌环直径 * 噬菌体裂解试验：特异性高，AP631炭疽噬菌体 NaHCO3毒力试验： 接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板， 10%CO2、37℃、24～48h 有毒株形成荚膜—粘液型菌落 无毒株不形成荚膜—粗糙型菌落 动物试验：鉴定炭疽杆菌有无致病力或致病力的强弱 小鼠、家兔或豚鼠皮下接种 炭疽芽胞杆菌 * 植物凝集素试验： 　根据菌体多糖是植物凝集素受体的原理，用凝集素测定炭疽杆菌。常用方法有荧光标记试验和酶联凝集素试验 Ascoli热沉淀试验： 　抗原抗体沉淀反应，用已知的抗炭疽杆菌抗体测定标本中未知的抗原。特异性不高，能与其他需氧芽胞杆菌、14型肺炎链球菌、人A血型抗原发生交叉反应 炭疽芽胞杆菌 * 项目 炭疽芽胞杆菌 枯草芽胞杆菌 蜡样芽胞杆菌及其他需氧芽胞杆菌 形态 菌体两端平齐，竹节状、长链状大杆菌 菌体两端饨圆短链 菌体两端饨圆短链 荚膜 + ? ? 动力 ? + + 菌落 粗糙、呈卷发状 粗糙、锯齿状 呈腊样光滑 溶血 不溶血或微溶 溶血 溶血 串珠试验 + ? ? NaHCO3 BAP M型（弱毒或无毒R） R型 R型 噬菌体裂解试验 + ? ? 青霉素抑制试验 + ? ? 动物毒力试验 + ? 蜡样+ 其他? Ascoli试验 + ? ? 炭疽芽胞杆菌 * 广泛存在于自然界中，条件致病菌 食物中毒（为主） 含菌量达105/g以上 呕吐型——耐热肠毒素 腹泻型——不耐热肠毒素 （一般认为13~36*106的活菌，才能引起食物中毒） 全眼球炎（外伤后）、软组织化脓性感染、 肺部感染、心内膜炎、败血症和脑膜炎 * 腊样芽胞杆菌 夏、秋季多见 食物有米饭、乳品、禽畜肉类、果汁饮料等，大多为加热烹调过的熟食 在米饭中极易繁殖，由米饭受污染引起的食物中毒在国内、外均为常见 中毒食物大多无腐败、变质现象，感官性状正常，应引起注意 * 形态与染色： - G+大杆菌 -生长6h后即形成圆形芽胞、位于 菌体中心或次末端、不大于菌体 -菌体两端平截，多数呈链状排列 -引起食物中毒的菌株多有周鞭 毛、无荚膜 * * 培养特性： 需氧或兼性厌氧 营养要求不高 最适温度30~35℃ 普通琼脂平板：菌落较大， 灰白色，表面粗糙，有蜡样光泽，呈蜡滴样，不 透明 液体肉汤培养基：均匀混浊生长，底部有少量散在沉淀 * BAP —浅灰白色似毛玻璃样菌落，有β 或 α溶血 卵黄平板—生长迅速，培养3h后，虽看不到菌落，但该菌可分解卵磷脂而形成白色的混浊环，称乳光反应或卵黄反应 * 生化反应： 能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、水杨素、糊 精，产酸不产气 能胨化牛乳，液化明胶，VP（+）、卵磷脂 酶（+） 生化特点经多次传代后，个别菌株可改变 ，鉴定时应注意 * 抵抗力： 耐热，食物中毒菌株的游离芽胞耐受100℃30min、干热120℃60min才能杀死 对氯霉素、红霉素、庆大霉素敏感，对青霉 素、磺胺、呋喃类耐药 标本采集： 可疑食物、患者的粪便及呕吐物 * 因食品暴露于空气中，在一定程度都会受到本菌污染，所以不能分离出该菌就认为是引起食物中毒的病原菌 确诊由该菌引起的食物中毒必须： 从食物中分离出菌数≥105CFU/g，提示本菌活跃生长，构成潜在危险 （一般认为13~36*106的活菌，才能引起食物中毒） 从可疑食物分离到的菌株与从病人粪便和(或)呕吐物中分离到的菌株属同一血清型 * * 检验程序 呕吐物、残留食物等 活菌计数 接种 普通琼脂平板、BAP 、卵黄平板 37℃18-24h 纯培养 动物试验（肠毒素测定） 生化反应