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专题八 生物技术实践
水、碳源、氮源、无机盐
配制培养基→灭菌
→接种→培养
尿素
稀释涂布平板法
纤维素
刚果红
无氧
30~35 ℃
让豆腐长毛霉
加卤汤装瓶
细胞的全能性
脱分化和再分化
pH、温度、光照
水蒸气蒸馏法
压榨法
萃取法
纸层析法
走进高考
1.PCR 产物中加入二苯胺试剂,加热变蓝说明有目的DNA产生(2015江苏,23D)( )
2.用稀释涂布平板法培养计数,应选择有30~300菌落数的平板(2015四川,3D) ( )
3.醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(2014广东,4B)( )
4.用纸层析法提取菠菜绿叶中的色素和鉴定胡萝卜素提取粗品(2014四川,14C)( )
5.先供氧进行果醋发酵,然后隔绝空气进行果酒发酵(2013江苏,14B)( )
6.培养基分装到培养皿后进行灭菌(2013江苏,18A) ( )
7.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列(2013江苏,22B)( )
8.用洋葱进行DNA 粗提取和鉴定实验时,加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨(2013江苏,4A)( )
9.尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,可以反复使用(2012江苏,17C)( )
10.腐乳制作所需要的适宜温度最高(2011江苏,3A)( )
【自我校对】
1.× 变蓝说明有DNA产生,但不能说明一定是目的DNA。
2.√
3.× 用醋酸菌酿醋时需要持续通气,即利用醋酸菌的有氧呼吸。
4.× 纸层析法可用来分离色素,而不能提取色素。
5.× 进行果酒、果醋发酵实验,要先进行隔绝空气果酒发酵,再供氧进行果醋发酵。
6.× 在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板。
7.√ PCR法扩增目的基因只需要知道基因两端的序列,设计合适的引物即可。
8.× 加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和。
9.× 尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开,而不能再次使用。
10.× 酵母菌酒精发酵适宜温度是18~25 ℃,醋酸菌醋酸发酵的适宜温度是30~35 ℃,腐乳制作中豆腐长出毛霉的适宜温度是15~18 ℃。
考点一
考点二
考点三
考点四
固体
液体
选择
鉴别
平板划线法
稀释涂布平板法
灼烧
干热
活菌计数法
显微镜直接计数
考点一
考点二
考点三
考点四
2.选择培养基的选择因素
(1)培养基中缺乏氮源时,可以分离 微生物,因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。?
(2)当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。如石油
是 时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的。?
(3)改变微生物的 ,也可以达到分离微生物的目的。如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。?
固氮
唯一碳源
培养条件
考点一
考点二
考点三
考点四
例1:(2014课标全国Ⅱ理综,39)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题。
(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。?
(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过 灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是 。?
考点一
考点二
考点三
考点四
(3)示意图A和B中, 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。?
(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。其原因是:振荡培养能提高培养液中 的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高 的利用率。?
考点一
考点二
考点三
考点四
解析:为了检测培养基灭菌平板是否合格,应对空白平板先行培养一段时间。每升水样中的活菌数为(39+38+37)÷3÷0.1×100×1 000=3.8×107(个)。对接种环应进行灼烧灭菌。为了将聚集的菌体逐步稀释以获得单个菌落,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。A表示的是平板划线法接种培养后得到的结果,B表示的是用稀释涂布平板法接种后得到的结果。
答案:(1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107
(
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