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第六节 主要经济植物组织培养技术
一、菊花的组织培养技术
二、蝴蝶兰的组织培养技术
三、大花蕙兰的组织培养技术
四、美国红栌的组织培养技术
五、马铃薯的脱毒与快繁技术
蔡艳丽
菊花的组织培养技术
(一)培养意义
菊花的繁殖可以用播种法、扦插法、分株法、组织培养法。在种苗生产上运用最为广泛的方法是扦插和组培。由于菊花的病毒病种类比较多,而且危害也较为严重。使用扦插繁殖苗,容易引起病毒病的扩张和蔓延,因此茎尖脱毒培养和组培快繁生产母株植株,再生产扦插苗的技术,对优良品种的脱毒和复壮有重要意义。
1.外植体的选择与处理
2.外植体的清洗、消毒与接种
3.初代培养
4.增殖与继代培养
5.生根和移栽
二、培养程序
1.外植体的选择与处理
以花序轴为外植体时,选取具有该品种典型特征的,饱满壮实的花蕾,最好是将要开放而没有开放的花蕾,这时花瓣外好象有一层薄膜包围着,里面仍是无菌的,采回实验室后做表面消毒,便于无菌条件下剥离出花序轴。
2.外植体的清洗、消毒与接种
材料初步切割后,用洗衣粉水漂洗,再用自来水冲净后,在超净工作台上将其放入70%~75%的酒精中浸润30 s,转入2%次氯酸钠溶液中消毒8~15 min,并不时摇动,最后于无菌水中漂洗3~5次后待用。
茎段从两端切去一小段;花蕾须剥去花被,用中部花瓣或花序轴接种。
3.初代培养
在24~26℃,每天12~16 h,光强 1 000~4 000 Lx条件下,外植体经培养后,一般10~20 d茎尖处可分生出新芽,茎段的叶腋处也会萌发出新芽。而花蕾外植体经过15~20 d的培养,会形成愈伤组织;再经过20~30 d的培养,愈伤组织就会分化出较多的丛生芽 。
4.增殖与继代培养
将从以上外植体诱导分化出的单芽或丛生芽,分切成数段或数块放入增殖培养基中继代培养。开始分化率和分化苗的数量都较小,随继代次数增加,分生苗很快就能够增多起来。
增殖方法还有:用产生的嫩茎为材料,培养其长到一定高度时,将嫩梢剪成一节带一叶的茎段,然后插入MS或MS+NAA0.1 mg/L的培养基中培养,4~5周后,腋芽即生长成小植株,再照上述方法切剪茎段,重复培养,从而达到快繁的目的。
5.生根和移栽
菊花无根苗生根一般较容易,通常在增殖培养时久不转瓶,即可生根,但这种根的根毛较少或无,不利于将来移栽和生长,所以常用下列方法处理:
(1)无根苗的试管生根,切取3 cm左右无根嫩茎,转插到1/2MS+NAA(或IBA)0.05 mg/L的培养基中,经10 d左右即可生根,然后移栽驯化。
(2)无根嫩茎直接插植到基质中生根。剪取2~3 cm无根苗,插植到珍珠岩或蛭石的基质中,基质事先用生根激素溶液浸透,l0d后生根率可达95%~100%。
6.出瓶苗的过渡管理
菊花的有根苗移栽成活容易,将有根的植株从瓶中用镊子轻轻夹出,洗净根部黏附的琼脂,栽入蛭石基质中。然后加设小拱棚以保湿,随着幼苗的生长,逐渐降低空气湿度和基质含水量,转为正常苗的管理阶段。移栽前期将空气湿度保持在75%~85%之间,遮光率为40%,环境温度控制在20~26℃,就可使试管苗在20d左右移栽成活,并长出新根新叶。
分化芽
二、蝴蝶兰的组织培养技术
(一)培养意义
蝴蝶兰属于兰科、蝴蝶兰属,为多年生热带花卉,是世界上栽培最广泛、最受喜爱的洋兰之一。
蝴蝶兰的繁殖大多采用分株的方法,得到种苗量少,不能满足栽培的需求。通过组织培养技术繁育蝴蝶兰种苗,实现“兰花工业”是目前繁殖率最高、种苗质量最优秀的方法。
(二)培养程序
1.外植体的选择
2.外植体的处理、接种与初代培养
3.增殖与继代培养
4.壮苗与生根培养
5.驯化移植
二、培养程序
1.外植体选择
蝴蝶兰的组织培养外植体有茎尖、茎段、叶片、花梗腋芽、花梗节间、根尖等,各部位都能诱导成功,只是难易程度不一。
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