第三章：微生物代谢幻灯片.ppt

复习思考题 1．? 微生物的分解代谢与合成代谢之间的区别与联系 2．? 比较呼吸、无氧呼吸和发酵的异同点 3．? 化能异氧微生物的基质脱氢和产能途径主要有几类？主要特点 4．? 呼吸链在细菌和真菌中有何不同 5．?图示由EMP中的重要中间代谢物——丙酮酸出发的五种发酵类型 6．? 何谓巴斯德效应 7．? 试从狭义和广义两方面说明发酵的特点 8．? 细菌鉴定中常用的MR,VP实验的原理 9．? 细菌酒精发酵有何特点。发酵途径如何，与酵母菌的有什么不同 10．试述几种产生ATP的方式，各有什么特点 11．微生物对O2的关系怎样，为什么专性厌氧菌在有氧时不能生存 12．目前所认识的固氮机制是怎样 13．什么是生物合成三要素、各自是如何产生的 14．简述E.coli肽聚糖合成过程，哪些化学因子可抑制其合成，抑制部位 15．初级代谢与次级代谢有何区别，次级代谢产物包括哪些？ 16．微生物代谢调控的主要机制以及在生产的应用 17．简述六族氨基酸的合成 18．名词解释：呼吸链 calvin cycle 生物固氮 葡萄糖效应 4、顺序反馈抑制：代谢途径中第一个酶不受终产物抑制，而受分支处中间产物抑制，终产物抑制引起中间产物积累，从而抑制第一个酶。如红色假单胞菌的Ile合成。 5、积累反馈抑制：每一个终产物单独、部分地抑制共同步骤的第一个酶，互不影响。 如大肠杆菌的Gln合成酶受8个终产物抑制。 调节位点（变构中心） 反馈抑制机制：变构酶 底物位点（活性中心） （五）酶活性共价修饰 由一个修饰酶（活化酶）催化另一种酶起共价修饰的改变，从而改变后者活性。 酶-X 酶 + X （X：小分子化合物） 修饰酶 如大肠杆菌Gln合成酶：AMP与酶共价结合时（腺苷酰转移酶催化）活性低，脱去AMP，活性高。 胶质假单胞菌柠檬酸裂解酶：乙酰化（有活性），脱乙酰化（无活性） 二、代谢调控应用 (一）在初级代谢产物生产上应用 反馈调节最重要，要绕过，方法如下： 1、降低末端产物浓度（应用营养缺陷型解除正常反馈调节） 单线途径：应用营养缺陷型积累中间代谢物，采用低浓度终产物供给。 Ea Eb Ec A B C D E Ec 缺失，积累C，低浓度供给E。 分支途径：积累末端产物。 E1 F G A B C D E E2 H I E1缺失，限制I，少量E→G，大部分分泌。 Lys生产：高Ser缺陷型， 肌苷酸生产：腺嘌呤缺陷型， 2、筛选抗反馈突变株（解除反馈） 在含有抗代谢物的培养基中培养，筛选抗性突变株，其中一些可分泌大量末端产物。如对氨基Phe/Tyr, 7-氮杂Trp/Trp 3、控制细胞膜渗透性 通过生理学或遗传学方法，改变膜透性，使胞内代谢物迅速渗漏到胞外，解除反馈抑制。 （二）在次级代谢产物生产上应用 次级代谢产物通常在细胞生长后期形成，主要是抗生素、毒素、甾体化合物等。在自然条件下，微生物产生次级产物能力一般不高，其生产也受代谢调控。 可通过诱变育种和控制环境条件来提高产量，但次级产物合成途径比较复杂，许多还不清楚，因此关于次级产物合成的确实控制部位还大多不明。 青霉素生产中，葡萄糖虽能很好利用，但生产不适宜，而乳糖虽缓慢利用，却可多产青霉素。在含葡萄糖和乳糖混合培养基中，生长阶段迅速利用葡萄糖，葡萄糖用尽时，对乳糖利用解阻遏，不生长，但产青霉素。也可利用后期流加限量葡萄糖的方法实现。 其他次级产物生产也广泛采用这种方法。另外，氮源种类、浓度对次级产物产生与积累也有很大的影响，磷酸盐也有影响。 （三）在酶生产上应用 酶合成受基因和代谢物双重控制 1、加诱导剂 诱导酶只有在诱导剂存在时形成，在培养基中加入诱导剂。要注意底物诱导剂的浓度。 2、降低阻遏物浓度 参与分解代谢的酶，通常受诱导和阻遏双重控制，包括终产物阻遏和分解代谢物阻遏。 为了大量生产酶，要避免使用丰富，复杂培养基，不要含快速利用的糖类。合成酶类通常被终产物阻遏，要对产生阻遏的化合物加以限制。 3、利用突变产生不需诱导物或不受阻遏的突变体 （1）生长在低浓度诱导物中选育不需诱导剂的组成性突变株。 （2）利用抗代谢物，筛选不受终产物阻遏的突变体。 （3）