第38讲基因工程课件.ppt

典例分析 (2009·江苏卷,34)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀 虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物 的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),据 图回答下列问题。 (1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后, 反应管中有____种DNA片段。 (2)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶 连接的过程,此过程可获得____种重组质粒;如果换 用BstⅠ与BamHⅠ酶切,目的基因与质粒连接后可获 得_____种重组质粒。 (3)目的基因插入质粒后,不能影响质粒的______。 (4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带 有目的基因的T-DNA导入植物细胞，并防止植物细 胞中_________对T-DNA的降解。 (5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上 皮细胞表面的特异受体,使细胞膜穿孔,肠细胞裂解, 昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小,原 因是人类肠上皮细胞_____________________。 (6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合 播种,其目的是降低害虫种群中的______基因频率的 增长速率。 解析 (1)用HindⅡ、BamHⅠ完全酶切后，应有4种 DNA片段。(2)用HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶 连接的过程中,获得的黏性末端有两种,可形成1种重 组质粒,而BstⅠ与BamHⅠ酶切后，形成的粘性末端 相同,所以可形成2种重组质粒。(3)目的基因插入后 不能影响质粒复制。(4)vir蛋白与T-DNA结合在一起, 使DNA水解酶不能分解。(5)人类肠上皮细胞表面无 相应特异性受体,所以毒素蛋白对人类影响小。(6)降 低害虫种群中抗性基因频率的增长速率,往往用转基 因作物与非转基因作物混合播种。 答案 (1)4 (2)1 2 (3)复制 (4)DNA水解酶 (5)表面无相应的特异性受体 (6)抗性 变式训练 科学家通过基因工程方法,将苏云金芽孢 杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内,并成功 实现了表达,从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株 ——抗虫棉。其过程大致如图所示: 根据题意回答下列问题: (1)基因工程的操作程序主要包括的五个步骤是____ ____、__________、______、_______、_______。 (2)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒,其上有T-DNA,把 目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA____ _____________________________________的特点。 (3)将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，该题 中涉及的是________________________________。 (4)目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传 特性的关键是______________,这需要通过检测才能 知道,检测采用的方法是______________________。 答案 (1)获得目的基因 形成重组DNA分子 将重 组DNA导入受体细胞 筛选含有目的基因的受体细胞 目的基因的表达 (2)可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的 DNA上 (3)农杆菌转化法 (4)目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上 DNA分子杂交技术 题组一:基因工程的工具 1.限制性核酸内切酶是一种核酸切割酶,可识别并切 割DNA分子上特定的核苷酸序列。如图为四种限 制酶BamHⅠ,EcoRⅠ,HindⅢ以及BglⅡ的识别序 列。箭头表示每一种限制性核酸内切酶的特定切 割部位,其中哪两种限制性核酸内切酶所切割出来 的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补 序列是 ( ) 随堂过关检测 A.BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互补序列-AATT― B.BamHⅠ和HindⅢ;末端互补序列-GATC― C.EcoRⅠ和HindⅢ;末端互补序列-AATT― D.BamHⅠ和BglⅡ;末端互补序列-GATC― 解析 BamHⅠ切割出来的末端是CCTAG和GATCC, G G EcoRⅠ切割出来的末端为CTTAA和AATTC， HindⅢ切割出的末端为TTCGA和AGCTT,BglⅡ切割 出的末端为TCTAG和GATCT,所以BamHⅠ和BglⅡ 切出的末端是互补的,其互补处为—GATC—。 答案 D G G A A A A 2.下列关于质粒的叙述,正确的是 ( ) A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细 胞器 B.质粒