过敏原血清学检测与临床应用技术总结.pptVIP

过敏原血清学检测 金 花 2013.3.22 基本概念 ? 过敏反应： ? 1906年von Piguet提出了allergy一词。其概念为：机体对抗原刺激产生 的一种“改变了反应性”的状态。这种状态可能是保护性的，即产生了 免疫力；也可能是破坏性的，即产生了超敏反应。 ? 超敏反应是机体对某抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时，发生 的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。 ? 过敏原：致敏原 or 变应原 ? 能够使人发生过敏的抗原。 吸入过敏原 接触过敏原 过敏原 输注过敏原 过敏原 食物过敏原 4种过敏反应类型 (超敏反应) by Coombs und Gell (1963) Type I 早期反应 核 Platzhalter 数分钟内 花粉热 Type II 细胞毒反应 坏 数小时到一天 输血反应 Type III 免疫复合物形成 IgE-介导肥大细胞脱 IgG/IgM介导靶细胞的破持续产生IgG/IgM 免疫复 合物 Platzhalter 数小时到一天 farmers lungs Type IV 细胞免疫反应 T-细胞介导反应 12小时到数周 接触过敏反应 (Ni) ? 过敏性鼻炎、鼻息肉、鼻窦炎 ? 过敏性眼病 ? 哮喘、过敏性肺炎 ? 特应性皮炎和接触性皮炎 ? 慢性荨麻疹和血管性水肿 ? 过敏性休克 ? 昆虫过敏 ? 药物过敏 ? 食物过敏 from《Manual of Allergy and Immunology》 常见过敏性疾病 流行病学 ? ? ? 平均发病率20%（8~45%） 过去10年，成倍增加（doubled） 二十一世纪的流行病（the epidemic of 21th century） Triggers Episodic （多有明显诱因） （呈发作性，症状来得快，去的快） Reversible （可完全缓解,查体常无阳性体征） Recurrent （病情反复，多与过敏原暴露相关） Atopic （特应性，发生于过敏体质者） 临床表现的特点 引起过敏反应因素 ? 遗传因素 ? 接触过敏原的机会 ? 抗原性质 ? Th细胞及细胞因子 过敏反应: 诊断 IgE检测原理 From ALLERGY 4th Edition 检测IgE 步骤1: 总IgE ? ELISA 步骤2: 特异性 IgE ? EUROLINE Extinction 总IgE ELISA 标准品 100 IU/ml 10 IU/ml 0 IU/ml WHO 75/502 ? 4 点定标 Example for a standard curv e 0 0,5 2 500 IU/ml 1,5 1 0 100 200 300 400 500 600 IgE [IU/ml] 年龄 最高参考上限 新生儿 1.2 IU/ml 1-6 月 7.2 IU/ml 7-12 月 12.7 IU/ml 1-5 岁 60 IU/ml 6-9 岁 155 IU/ml 10-15 岁 199 IU/ml 16岁 100 IU/ml 总IgE ELISA: 参考范围 参考范围 参考范围 ： ： 可能存在过敏反应 一般无过敏反应 特异性 IgE：EUROLINE ? 简便和快捷的实验操作 ? 仅需少量样本 (过夜温育) ? 结果基于广泛应用的EAST分级系统 ? 通过EUROLineScan程序实现结果的自动判读 EUROLINE检测系统 颜色反应 底物 膜条 色原 抗原提取物 特异性 IgE：EUROLINE 温育 AP标记二抗 AKP 清洗 3 x 5min 60 min 二抗反应 清洗 3 x 5min 10 min 底物温育 自动化判读或肉眼观察 60 min 未稀释 过夜 1:11 稀释 类别 浓度[kU/l] sIgE水平 临床意义 0 0.35 未检出 不过敏 1 0.35-0.7 低 较敏感 2 0.7-3.5 中 有临床症状 3 3.5-17.5 高 重 4 17.5-50 很高（+） 很重 5 50-100 特高（++） 特重 6 100 特高（+++） 特重 特异性IgE分级标准及临床意义 ? 结果判读: EUROLineScan 特异性 IgE 欧蒙印迹法自动化 IgE 名称/商品名 货号 检测内容 检测项目 特点 吸入及食物组合 DP3713- 1601-4E 尘螨组合1（屋尘螨/粉尘螨)、猫毛、狗上皮、屋尘、蟑螂、霉菌 组合1（点青霉/分枝孢霉/烟曲霉/交链孢霉）、树组合2（柳树/杨 树/榆树）、矮豚草、艾蒿、葎草、牛奶、鸡蛋白、花生、海鱼组 合1（鳕鱼/龙虾/扇贝）、CCD 标记物、质控带 10项吸入、 4项食物、 CC