第三章 细胞生物学方法答案.ppt

多莉 克隆猴 S=(dx/dt)/?2x =1?10-13sec. 差速离心 等电聚焦电泳 直接免疫荧光标记与间接免疫荧光标记技术 免疫印迹（western　blotting） SDS（或双向电泳）——转移到膜上——免疫显色 （二）特异蛋白抗原的定位与定性 原理：利用免疫反应定位组织或细胞中抗原成分分布的一类技术。 类型： 免疫荧光技术 免疫印迹反应 免疫电镜技术 免疫铁蛋白技术 免疫酶标技术 免疫胶体金技术 （三）细胞内特异核酸的定位与定性 原位杂交技术 放射性同位素标记：利用放射性核素所放射出来的射线作用于感光材料的AgCl晶体，从而产生潜影，并通过显影过程把“像”显示出来，以研究用放射性核素标记的物质在生物体内的定位和定量的一种技术。 生物素标记 （四）定量细胞化学分析与细胞分选技术 细胞成分的细胞化学显示方法 福尔根反应：测定DNA含量 PAS反应：检测多糖 苏丹Ⅲ染色：检测脂滴 米伦反应：检测蛋白质 流式细胞术 可定量测定细胞中DNA、RNA或某一特异的标记蛋白的含量，以及细胞群体中上述成分含量不同的细胞的数量；它还可以将某一特异染色的细胞从数以万计的细胞群体中分离出来，以及将DNA含量不同的中期染色体分离出来，甚至可用于细胞的分选。 三、细胞培养与细胞工程 细胞培养 细胞工程 （一）细胞培养技术 动物细胞培养 原代细胞培养 传代细胞培养 培养方法：贴壁培养、悬浮