酶促动力学专题.pptVIP

催化性质 酶是生物催化剂，与无机催化剂相比，二者有共性： 1、用量少而催化效率高 2、不改变化学反应的平衡点 3、可降低反应的活化能 酶之所以具有催化能力，主要在于它们具有一个所谓的“活性部位”。正是由于有这种结构才使之具备上述催化生物化学反应的功能。 酶的活性部位 “活性中心” 指酶蛋白上对于催化底物发生反应具有关键作用的区域。 进一步说，活性部位本质是蛋白质多肽链上原本相距较远的一系列氨基酸残基经由折叠而形成的特定区域。在这个区域内，特定的、对于催化反应具有贡献的氨基酸残基的侧链基团的空间配置恰到好处，有助于酶与底物的结合，有助于底物的转变。 溶菌酶的活性中心 酶催化作用的特点 酶的化学本质是蛋白质、核酸，在生物体内作用，酶的作用特性为： 1、高效率； 2、酶的作用具有高度的专一性； 3、酶易失活，从而丧失原有催化活力； 4、酶活力可调节控制； 5、酶的催化活力可能与辅酶、辅基和金属离子有关。 影响因素 一、底物浓度的影响 当 V＝1/2 Vm时，则Km＝[S]。关于米氏常数Km，它实际上是反应速度达到酶催化反应速度最大值的一半时所需的底物浓度。因此，米氏常数是有单位的。一种酶的Km数值越大意味着什么？ 各种抑制作用的比较 列出了不同情况下的酶反应动力学方程式，以及相比于不存在抑制因素的条件下其Km和Vm的变化情况。 酶的催化反应机制 酶专一性的机制 酶催化的常见机制 酶专一性的机制 锁钥学说(lock and key theory) 诱导契合学说(induced-fit hypothesis) 酶高效催化的常见机制 * * 谷氨酸35和天冬氨酸52是催化基团； * 色氨酸62和63、天冬氨酸101和色氨酸108是结合基团； * A~F为底物多糖链的糖基，位于酶的活性中心形成的裂隙中。 RNase-底物复合物 专一性 绝对专一性：除一种底物以外，其它任何物质它都不起 催化作用。 相对专一性 立体专一性 ：只能对一种立体异构体起催化作用，对其 对体则全无作用。 基团专一性：除了要求A和B之间的键合适外，还对其所作用键两端的基团具有不同的专一性 。 键专一性：只要求底物分子上有适合的 化学键就可以起催化作用 。 这种专一性催化作用，对于其在食品、化工等领域的应用具有重要实践意义。 1、在酶浓度，pH，温度等条件 不变的情况下研究底物浓度和 反应速度的关系。如右图所示： 2、米氏方程 1913年，德国化学家Michaelis和Menten根据中间产物学 说对酶促反应的动力学进行研究，基于平衡假设推导出了表 示整个反应中底物浓度和反应速度关系的著名公式，称为米 氏方程，式中Km称为米氏常数。 后来，其他学者进一步根据所谓恒态假说，即假设酶催化 反应过程中[ES]浓度基本保持恒定不变，推导出修正后的 米氏方程，形式上与上述公式完全相同。它体现了各种因 素对于酶促反应速度的综合影响。 二、酶浓度的影响 在一定条件下，酶反应的速度与酶的浓度成正比。因为酶催化反应时，首先要与底物形成所谓中间物，即酶底物复合物[ES]。当底物浓度大大超过酶浓度时，反应达到最大速度Vm，如果此时增加酶的浓度，可增加反应速度，酶反应速度与酶浓度成正比关系。 三、温度的影响 温度对酶反应的影响是双重的： （1）随着温度的增加，反应速 度也增加，直至最大速度为止。 （2）随温度升高而使酶逐步变性。 故酶总有一个最适反应温度，在这个温度时，酶的活力最高。 在10-80℃常温范围内，酶活力随着反应温度的变化趋势一般可表示如右图。 四、pH的影响 在一定的pH下, 酶具有最大的催化活性，通常称此pH为最适pH。但是需指出，所谓“最适pH”实际上是一个操作参数。 在不同pH时活性发生变化的原因主要在于： （1）pH能影响酶分子结构的稳定性。 （2）pH能影响酶分子的解离状态 。 五、酶原的激活和激活剂 有的酶在分泌时是无活性的酶原，需要经某种酶或酸 将其分子作适当的改变或切去一部分才能呈现活性，这 种激活过程又称酶原致活作用或酶原激活作用。 凡是能提高酶活性的物质，都称为激活剂。 酶的激活剂多为无机离子或简单有机化合物。 六、酶的抑制作用和抑制剂 非专一性不可逆抑制 不可逆抑制 专一性不可逆抑制