07细菌感染的检查方法和防治原则技术总结.pptxVIP

1 第七章 细菌感染的诊断与防治原则 2 细菌感染的实验室诊断主要包括： 细菌学诊断 ----以检测致病菌及其抗原或代谢产物为目的 血清学诊断 ----以检测患者血清中特异性抗体为目的 基因诊断 ----以检测致病菌特异性DNA片段为目的 3 第一节 细菌学诊断 一、临床标本采集 4 1、直接涂片染色镜检 形态和染色性上有特征的致病菌，直接涂片镜检后有助于初步诊断。如：痰中查抗酸性杆菌，脓液中找G+葡萄串样球菌等。 二、细菌学诊断方法 5 分离培养是确诊细菌感染性疾病最可靠的方法（“金标准”），所有标本均应作分离培养获得纯培养后进一步鉴定。 分离培养比直接涂片镜检阳性率高，但需时较久。 2、分离培养 6 可利用生物化学的方法测定细菌代谢产物以鉴定细菌。如肠道杆菌。 3、生化试验 糖发酵试验 7 4、血清学试验： 体外的抗原抗体反应也称为血清学试验。是临床细菌性疾病诊断和病原菌鉴定的重要手段之一。 8 血清学试验包括血清学鉴定和血清学诊断两方面。 血清学鉴定：即用含有已知特异性抗体的免疫血清去检测标本中或分离培养物中未知的细菌，以确定致病菌的种或型。 已知Ab →未知Ag 9 血清学诊断：用已知的细菌或其特异性抗原检测患者血清中有无相应特异性抗体和其效价的动态变化，作为某些感染性疾病的辅助诊断。 已知Ag →未知Ab 10 血清学试验常用方法有玻片凝集试验，简单易行且特异性强。尚有免疫荧光、酶免疫、协同凝集、乳胶凝集、反向间接凝集等试验，优点：快速、灵敏且不受抗生素等药物影响。 玻片凝集试验 11 主要用于分离、鉴定致病菌，测定菌株产毒性等。 常用动物：小鼠、豚鼠、家兔 接种途径：皮内、皮下、腹腔、肌肉、静脉、脑内等。 5、动物试验 12 6、药物敏感试验 测定标本中致病菌对药物的敏感程度。对指导临床用药及控制感染有重要意义。常用纸碟法和试管稀释法。 13 第二节 血清学诊断 采用已知的细菌或其特异性抗原，检测患者血清或其他体液中有无相应特异性抗体及其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。 14 在血清学诊断中，最好采取患者急性期和恢复期双份血清标本。 结果：以抗体效价明显高于正常人水平或患者恢复期抗体效价比急性期升高≥4倍方有意义。 15 常用血清学诊断方法： 凝集试验 ----直接凝集试验、间接血凝试验、 乳胶凝集试验、冷凝集试验 沉淀试验 ----琼脂扩散法、对流免疫电泳 免疫标记技术 ----免疫荧光试验、ELISA、免疫印迹试验 16 第三节 分子生物学诊断 PCR技术 DNA探针技术 DNA芯片技术 17 细菌学诊断基本方法 18 第四节 细菌感染的特异性防治 人工主动免疫 人工被动免疫 19 一、人工主动免疫 人为地将疫苗（vaccine）或类毒素接种于人体，使机体主动产生特异性免疫力的一种防治微生物感染的措施。 20 常用制剂 疫苗 ----灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、 核酸疫苗、重组活载体疫苗、转基因植物疫苗和治疗性疫苗。 类毒素 21 1.灭活疫苗： 选用免疫原性强的细菌经人工大量培养后，用理化方法杀死而成。如伤寒、百日咳、霍乱等。 优点：易于保存。 缺点：接种剂量大；维持时间短；接种次数多；注射的局部和全身性副反应较大；不产生细胞免疫应答。 22 2.减毒活疫苗： 用减毒或无毒力的活病原体制成。如BCG、鼠疫和炭疽等。 优点：只需接种一次；接种剂量较小；副反应轻微或无；免疫效果好且持久；能同时产生细胞免疫和体液免疫二种应答。以自然途径接种，有SIgA抗体的局部粘膜免疫形成。 缺点：不易保存，需冷藏且保存期短。可能有返祖现象。 23 24 3.亚单位疫苗： 由细菌主要保护性免疫原组成的疫苗称为亚单位疫苗。如肺炎球菌、脑膜炎球菌的荚膜多糖，钩端螺旋体的外膜蛋白等。 25 4.核酸疫苗： 又称DNA疫苗、基因疫苗 是将能编码引起保护性免疫应答的病原体抗原基因片段插入到载体基因组中（如质粒、病毒等），再注入宿主体进行复制，以表达目的抗原，进而诱出机体针对该抗原的特异性免疫应答的新型疫苗。如乙肝疫苗。 26 重组活载体疫苗 转