用于生物诊断的等离子纳米学案.pptVIP

AuNPs检测肿瘤，表皮生长因子受体（EGFR）过表达： DTTC：拉曼reporter，硫化聚乙二醇（PEG-SH）：稳定，单链抗体可变区基因片段（ScFv）连NP，可与EGFR结合 在体深度可达4.5-5 cm 近红外区SERS最优reporter： CyNAMLA-381最优，12倍高于标准DTTC 被BSA和戊二醛保护，防止聚集和reporter解离 确定脑肿瘤边界： 指导肿瘤切除手术 AuNPs检测肿瘤 确定脑肿瘤边界 近红外区SERS最优reporter 检测实验多，临床应用难 寡核苷酸修饰AuNPs比色法检测目标DNA已经商业化生成，可以满足多种检测目的 该团队还开发了抗原抗体型检测和microRNA检测 总结： 多种基于LSPR和SERS的实验 可以满足不同生物标志物的检测范围 展望： 具有由实验到临床应用转变潜力 快速，高精度和价格低廉的诊断 用于生物诊断的 等离子纳米材料 量子点，磁性颗粒，碳管，贵金属颗粒等 优点： 信号增强 可调节的表面修饰 极大的反应表面积 制备：表面修饰，防止聚集 问题： 非特异作用 不易用于生理溶液 金属纳米颗粒（如金纳米颗粒）由于其具有局部表面等离子共振（LSPR）现象而被用于检测目标生物分子 原理： 入射光激发→电子集体震荡； 入射光频率和表面电子震荡的固有频率相符； 效果： 在可见光频率上的显著吸收峰； 颗粒表面的强电磁场（可极化周围局部的空间）； 检测基础： 纳米颗粒和溶液接触面的相互作用影响共振情况； 可通过吸光度的变化以及溶液颜色变化来检测； 现象： 球形AuNPs：均匀分布的溶液为亮红色 金纳米棒（AuNRs） 自由电子沿着长轴和短轴震荡，产生两种等离子波长； 改变棒的长宽比，可以使得长轴等离子波长在近红外区（NIR），可用700-900nm范围的探测器检测； 血红蛋白和水的吸光度最低，光最大穿过血液和组织； 金纳米星（Au nanostars） 突出尖角上有增强场； 被测分子容易接近； LSPR峰向NIR移动； 基于纳米 颗粒组装 现象：分散颗粒聚集，显著颜色变化（红→蓝）； 应用：比色法检测或吸光度偏移检测； 比色法不足： 1.极限灵敏度低； 2.动态范围窄； 待测物引起 的折射率变化 待测物进入LSPR范围引起折射率局部扰动； 标记法影响待测物性质增加实验复杂度； LSPR的无标记生物检测灵敏度高； 酶控生长 比色检测 纳米结构变化导致LSPR峰的剧烈偏移： 1.新颗粒的成核和生长； 2.在已有颗粒的壳结构受控生长； 基于AuNP聚集，检测癌细胞 在AuNPs覆盖寡核苷酸适配子，AuNPs连接到靶细胞（癌细胞），AuNPs有效聚集，颜色变化（红移）； 检测极限（LOD）为90个细胞在透明溶液； 不足：有色血清无法检测，需预处理； 基于AuNP聚集，检测唾液与尿液溶菌酶： 在白血病，肺结核和严重细菌传染病时溶菌酶丰度上升； 在AuNPs表面覆盖溶菌酶DNA适配子，在盐溶液中稳定分布； 溶菌酶存在，适配子优先结合酶，AuNPs上适配子脱落，AuNPs聚集，颜色红→蓝； 1nM足够产生可检测到的颜色变化。 基于AuNP聚集，检测唾液与尿液溶菌酶 Ag粒子在Au纳米星溶液中不同生长方式反比例检测： 传统信号正比于浓度，限制了低浓度检测； 葡萄糖氧化酶（GOx）浓度低-Ag离子多-吸附生长-强蓝移； Gox浓度高-Ag离子少-成核生长-弱蓝移； 前列腺特异抗原（PSA）为例，极限为10-18gmL-1（4×10-20M）； AuNPs的等离子属性实现超低浓度检测（肉眼可见的颜色变化）： 超敏检测常需精细仪器设备和昂贵的试剂； 待测物捕获，引入酶标抗体，加入AuNP前体，形成AuNP； 过氧化氢浓度高-非聚集球形NPs，溶液颜色为红色； 过氧化氢浓度低-聚集的NPs，溶液为蓝色； Ag粒子在Au纳米星溶液中不同生长方式反比例检测 AuNPs的等离子属性实现肉眼可见的超低浓度检测 调节AuNRs长宽比检测HNsAg： HBsAg浓度下线为0.01IU/mL，比传统ELISA低40倍； 区分乙肝阳性样本和阴性对照组，红移大概为4.3-30nm； 基于溶液的LSPR： 1.极大的检测表面积 2.高扩散率可提高反应速度和灵敏度 AuNRs和MNPs共同检测心肌肌钙蛋白（cTnI）： 磁性纳米颗粒（MNPs）用于增强折射率和质量； MNPs也可用于分离和富集目标分子在复杂的生理环境下； 30pM的下限，平均增强210%的红移； 多种待测物同时检测： AuNRs的不同长宽比设计检测器 无需预处理 调节AuNRs长宽比检测HNsAg AuNRs和MNPs共同检测心肌肌钙蛋白（cTnI） 双层AuNPs和TiO2构成表面检测磷酸化后