中药化学实验技术精讲.ppt

中药化学实验技术 第一节 中药成分与定性鉴别 一级代谢产物与二级代谢产物 大分子与小分子 有机物与无机物 亲水性与亲脂性 大分子 小分子 多糖、低聚糖 蛋白质、酶 鞣质 苷类 橡胶 油脂和蜡 氨基酸 无机盐 单糖 挥发油 苷元 1、单糖、低聚糖、多糖 淀粉、粘液质、果胶、树胶、甲壳质等 鉴别 淀粉：加碘呈蓝色（紫红色） 还原糖：斐林试剂、吐伦试剂 非还原糖：Molisch反应 TLC、PC： 展开剂—— BAW系统 显色剂—— 苯胺-邻苯二甲酸 去除 醇沉法 2、氨基酸、蛋白质、酶 去除： 水煮变性沉淀法、乙醇变性沉淀。 鉴别： 加热沉淀试验：加热煮沸 →混浊或沉淀 +5%H2SO4（不加热）→混浊或沉淀 双缩脲反应：+40%NaOH，1%CuSO4 →紫红色 3、油脂 高级脂肪酸的甘油三酯 鉴别 油斑检查：油斑挥发 →挥发油； 油斑不消失→油脂或类脂 磷钼酸反应： 喷洒5%磷钼酸试液 → 蓝色（油脂、三萜、甾醇） 去除 醇提水沉, Pet萃取/脱脂 4、树脂 树体受伤后从树胶道内分泌渗出的一种液体，暴露在空气中，逐渐变成一种半透明的固体或者半固体物质。 混合物： 与挥发油或者树胶、有机酸等成分混合存在。 分为三类：树脂酸类、树脂醇类、树脂烃类。 性质： 非结晶性固体，不溶于水，能溶于乙醇、乙醚、丙酮、氯仿等有机溶剂。 鉴别 FeCl3试剂： 蓝、暗绿或蓝紫色 三氯化铁-铁氰化钾试剂：喷洒→蓝色斑点 香草醛-盐酸试剂：喷洒 →红色（间苯二酚、间苯三酚） 重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠 →红色 TLC：吸附剂——硅胶G或纤维素 展开剂—— n-BuOH：HAc：H2O；15%HAc 显色剂——1% FeCl3试液 1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液 →蓝、绿或黑色 分离（去除） 明胶沉淀法：水提液中加4%明胶水溶液，过滤； 浓缩，加3-5倍量乙醇，去明胶； 聚酰胺法：柱中不被醇洗脱的部分 醋酸铅沉淀法： 生物碱沉淀法：加1.5%咖啡因，CHCl3回收咖啡因； 氨水沉淀法：醇提液中调PH8 石灰乳法： 水提液浓缩液+20%石灰乳（pH12）。 6、色素 种类： 叶绿素、叶黄素、胡萝卜素（亲脂性） 花色苷类、黄酮苷、醌苷（亲水性） 除去叶绿素： 醇提液：浓缩加水； 水提液：pet萃取 吸附脱色法：活性炭、氧化铝、碳酸钙。 7、有机酸 种类： 游离型：脂肪酸、酚酸 结合型：金属盐、生物碱盐、脂肪、蜡、酯、苷等； 分离 亲水性酸：石灰乳或醋酸铅沉淀除去， 阴离子交换树脂； 亲脂性酸：碱溶酸沉； 鉴别 溴酚兰试液：喷洒→蓝色背景黄色斑点 三、中药成分的系统预试 石油醚、95%乙醇、5%HCl-乙醇、水 水提取液 中药材粉末5g，用10倍量水在50～60℃水浴上加热1小时，滤液用于糖、多糖、有机酸、皂苷、酚类、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质、生物碱等。 乙醇提取液 中药材粉末5g，用10倍量95%乙醇水浴回流加热1小时，滤液用于酚类、鞣质、有机酸、香豆素、强心苷、黄酮、蒽醌、甾体等预试验。 5%HCl-乙醇提取液 中药材粉末5g，用10倍量5%HCl-乙醇水浴回流加热0.5小时，滤液用于生物碱预试验。 第二节 溶剂与化合物溶解性 一、溶剂分类 水 价廉，无毒，易进植物细胞； 专属性差，难浓缩，不易保存。 亲水性有机溶剂 较价廉，毒性较小，易进入植物细胞； 专属性差。 亲脂性有机溶剂（多用于分离纯化） 专属性强，挥发性大，易回收； 易燃，毒性较大，价贵，设备要求高，难进入细胞。 溶剂 浸膏重 干浸膏 植物 次数 MeOH 20. 98% 0. 027 0. 0058 多次 EtOAc-Me2CO 7. 70 % 0. 084 0. 0065 1次 ( 1∶1) 极性基团