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实验一 分光光度法 测定CuSO4浓度 生物化学和分子生物学实验 1 必须穿白大褂； 2 书包放在实验台的上层架子上； 3 实验报告在课后24小时内由实验班长统一上交； 值日生注意事项强调： 1 清洁实验台、讲台和试剂架； 2 用湿抹布擦黑板； 3 清洁比色皿； 4 将所有移液枪调到最大量程； (一)基本原理 分光光度法是利用物质对某种波长的光具有选择性吸收的特性建立起来的鉴别物质或测定其含量的一项技术。（吸收特征、吸光强度） Lambert-Beer定律，吸光度与溶液的浓度成正比，与光束通过溶液的距离(即光程)成正比，用数学表达式表示为： A=KLC C：物质的浓度(mg/ml, mol/L)，L：光程（cm），K为吸光系数或消光系数。 互补色 互补色光—— 如：黄光和蓝光； 红光和绿光。 CuSO4呈蓝色是由于溶液吸收了黄光。 溶液越浓，光选择吸收越多，颜色越深。 当一束平行单色光通过溶液时，一部分被吸收，一部分则透过溶液。 入射光强度为I0，透射光强度为It， 则透光度T= 吸光度(A)或称光密度(OD)或称消光度(E) A= - lgT I0 It A=KLC 由于单色光透过溶液时，不仅被待测物质所吸收，而且还被比色容器与溶剂以及其它试剂