医学研究生开题详解.ppt

欢迎各位专家老师莅临指导 　　　HCC是多血管实体瘤，本实验拟通过动物实验观察参雄抗癌丸对小鼠H22移植性实体肿瘤的抑瘤效果及该药物对荷瘤H22小鼠肿瘤血管形成情况和肝癌瘤组织中VEGF及MVD表达的影响，为临床应用该药治疗肝癌提供客观而科学的理论依据。 原发性肝癌是典型的血供丰富的实体肿瘤，生长速度快，易转移，与其强大的血管生成能力有关。血管生成是肿瘤生长及转移必不可少的条件，1971年Folkman提出肿瘤生长及转移是血管依赖性的理论，阻断血管的生成可以作为抑制肿瘤生长的一种治疗策略。迄今多数学者充分肯定了MVD与肿瘤的生长﹑转移﹑预后的密切关系，认为它是一个反映恶性肿瘤生物学行为的重要参数。 肿瘤在其生长过程中可分泌大量的促血管生成因子。VEGF是一种分子量为34--50 KD的二聚体蛋白,由正常或肿瘤细胞产生,是一个重要的促血管生成因子，甚至被认为是最强的血管形成因子，VEGF表达水平反映了肿瘤血管内皮细胞增殖﹑迁移和血管构建的水平,直接反映肿瘤生长的速度和转移的倾向。在人类许多肿瘤中检测到VEGF的高表达，在肿瘤进展中血管生成可能是原癌基因激活和抑癌基因失活的结果。 国内外研究表明，运用抗血管生成因子如内皮抑素等可有效地抑制内皮细胞增殖，降低肿瘤组织MVD，从而达到抑制肿瘤细胞的生长、侵袭和转移的目的。MVD的检测可用于肿瘤患者的预后估计,MVD值是反映肿瘤血供的客观指标。因此在治疗原发性肝癌中联合检测VEGF表达情况和MVD值,对于判断肿瘤的转移潜能,及时干预治疗,减少转移,对于提高治愈率具有重要价值。 经费预算 1.材料购置费 2000元 2.试剂购置费3000元 3.检测劳务费2500元 4.文献检索费200元 5.论文打印及版面发表1500元 6.论文答辩1500元 共计：10700元 实验经费为研究生科研经费 　　　　　各位老师提出宝贵意见 * * * * * 参雄抗癌丸对荷瘤H22小鼠组织中VEGF及MVD表达的影响 研究生: 导 师: 教授 主要内容 1.选题的目的 2.选题的理论和实际意义 7.目前进展情况 3.主要研究内容 5.主要研究方法 4.主要技术路线 6.预期结果 选题目的 选题的理论和意义 　原发性肝癌简称肝癌，我国每年约有23万人死于该病，占全球肝癌死亡人数的53﹪。被列为我国重点研究的癌症之一。目前中医药治疗中晚期肝癌发挥的作用越来越大，可以明显改善患者的生活质量和延长其生存期。 主要研究内容 （2） 通过对移植模型中治疗组与模型对照组肿瘤体积变化、肿瘤重量变化及正常组与模型对照组、各治疗组之间胸腺指数与脾指数的变化，研究参雄抗癌丸的作用机制。 （3） 本实验采用肿瘤组织HE常规染色，从形态学上观察各组间肿瘤细胞密度，肿瘤坏死程度 （1） 动物移植性肿瘤模型的成功制备 （4） 用流式细胞仪检测各组的肿瘤细胞凋亡率；用免疫组化技术观察该药物对肿瘤组织VEGF及MVD表达的实验影响 （5） 本项研究采用腹腔种植H22瘤株制造肝癌模型，通过动物实验研究参雄抗癌丸对荷瘤鼠VEGF及MVD表达的实验影响，从分子水平探讨参雄抗癌丸对肿瘤的影响机制。从而为该药提供技术支持，并为其产品开发和走向市场提供理论依据。 主要技术路线 选购SPF级小鼠 动物造模及分组 参雄抗癌丸高剂量组 参雄抗癌丸中剂量组 参雄抗癌丸低剂量组 5-FU组 模型对照组 正常组 给药、标本采集和处理 检测： 1 肉眼观察 2 抑瘤率的测定 3 HE常规染色 4 细胞凋亡率及细胞周期的测定 5 免疫组化检测VEGF和MVD 统计数据，得出实验结果，撰写论文 主要研究方法 1.实验材料 1) 瘤株 H22 北京药物研究所引进，甘肃医学科学院传代保种。 2） 实验药品 参雄抗癌丸由甘肃省医学科学研究院制成水蜜丸剂，每包2克；5-FU注射液 3） 实验动物 SPF级昆明小鼠，雌雄各半，体重18～20g, 5～6w龄，由甘肃省中医学院动物实验中心提供 2.实验方法： （1）造模：从H22瘤株传代小鼠的腹腔抽取乳白色的瘤液，用生理盐水稀释至瘤细胞计数为2×106个/ml，胎盘蓝染色证实活细胞数达到96%，将瘤细胞悬液注射到小鼠右前肢腋窝部皮下0.2ml／只，接种的瘤细胞数约为5×106个／只。均在无菌条件下进行 （2）动物分组及给药方法:接种次日，将除正常组外的80只小鼠随机分为5组: A组为模型对照组，每日用蒸馏水灌胃；B组为阳性对照组，每天5-FU 10㎎/kg腹腔注射；C组为药物高剂量组1560㎎/kg灌胃。D组为药物中剂量组780㎎/kg 灌胃