分子生物学2013前四章.docVIP

分子生物学2013 名词20；填空判断30分；简答+论述=50 第一章 遗传的物质基础 1.遗传物质需要具备哪些特点？为什么蛋白质不能？RNA不能？ 1）在体细胞中含量稳定；2) 在生殖细胞中含量减半； 3) 能携带遗传信息； 4) 能精确地自我复制；5) 从进化的角度看，能发生变异； 2.几个验证核酸是遗传物质的实验：（知道基本过程） 1.肺炎链球菌转化实验—未得出结论；1944年,O.T.Avery—体外转化实验---证实DNA是遗传物质； 2.T2噬菌体转导实验（1952年, A.D. Hershey M. Chase32P——标记噬菌体DNA，35S——标记噬菌体外壳蛋白）； 3.真核细胞转染实验 4.烟草花叶病毒重建实验（RNA也是遗传物质） 3.碱基结构特征 ？位点差异深入了解 五碳糖和碱基之间的连接位置:嘌呤N9 嘧啶N1 核苷酸的连接 ①5’-三磷酸核苷酸是核酸合成的前体。 ②三磷酸的5’末端释放三磷酸的两个末端磷酸基团，磷酸与多聚核苷酸链末端的糖的3’-OH成键。 4.DNA的三级结构： 一级结构：指DNA分子中核苷酸的排列顺序，由于核苷酸之间的差异仅仅是碱基的不同，故可称为碱基顺序。 二级结构：DNA双螺旋结构。 发现： 1952年， Wilkins和Franklin用高度定向的DNA纤维作出高质量的X-光衍射照片； 1953年Watsosn Crick---双螺旋。 结构要点： ①主链（backbone）：脱氧核糖和磷酸基通过酯键交替连接而成。二条主链绕共同轴心以右手方向盘旋、反向平行形成双螺旋构型。主链处于螺旋外则。 ②碱基对（base pair）：碱基位于螺旋的内则，垂直于螺旋轴通过糖苷键与主链糖基相连。同一平面的碱基（A与T或G与C）在二条主链间以氢键形成碱基对。 ③大沟和小沟：分别指双螺旋表面凹下去的较大沟槽和较小沟槽。小沟位于双螺旋的互补链之间,而大沟位于相毗邻的双股之间。在大沟和小沟内的碱基对中的N 和O 原子朝向分子表面。 ④结构参数：螺旋直径2nm；螺旋周期10对碱基；螺距3.4nm；相邻碱基对的平面间距0.34nm。（以上数据基于B构象，（最常见的天然构象）） B-DNA（最常见的天然构象）Z-DNA区别 Z-DNA突出特点： 嘌呤与嘧啶交替排列(GGCGCG)； 左手双螺旋； 有一个螺旋沟，狭而深； 细胞DNA分子中确实存在Z-DNA区; 胞嘧啶第五位碳原子的甲基化，可使B-DNA不稳定而转变为Z-DNA。 三级结构：在一二级结构基础上的多聚核苷酸链上的卷曲。包括链的扭结和超螺旋或者是单链形成的环或是环状DNA中的连环体。 双螺旋的进一步扭曲折叠便构成DNA的三级结构，即超螺旋结构。超螺旋按照方向的不同分为正超螺旋和负超螺旋 5. 检测DNA三级结构的方法： 密度梯度离心 凝胶电泳 电镜观察 6. 不同类型DNA的三级结构及性质 染色体的结构 ---形成过程中宽度增加500-1000倍，长度压缩8400倍 i)核小体——染色体的初级结构第一级的包装(H2A、H2B、H3、H4各两个组蛋白组成8聚体组蛋白，H1起连接作用) ii）螺线体 iii）染色体环----超螺线体（非组蛋白参与） 7.ＤＮＡ的主要性质 1）DNA的碱基组成 GC含量：DNA的碱基组成通常用GC百分含量表示，注意所谓百分含量是指摩尔百分比。 2）DNA分子的形状与大小----以线形或环状形式存在，大多数是双链的，少数是单链的 大小：差异悬殊，大小可相差几十亿倍。 3）变性（Denaturation）或解链（melting） 稳定的双螺旋结构DNA分子由于维持稳定性的氢键和疏水键的断裂，松解为无规则线性结构的现象； 导致的理化及生物性质的改变： 　　　粘度降低、旋光性改变 　增色效应或高色效应(hyperchromic effect):核酸在紫外光260nm具有强烈的吸收峰。结构越有序，吸收的光越少。即游离的核苷酸比单链的RNA或DNA吸收更多的光，而单链RNA或DNA的吸收又比双链DNA分子强。当DNA变性时，其光吸收值增加，这种现象即为增色效应；反之为减色效应。 4）复性（Renaturation) 指变性DNA 在适当条件下,二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象,它是变性的一种逆转过程。 热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称为“ 退火”(annealing)。 8. 变性温度或融解温度(Tm)： 变性过程中在非常狭窄的温度范围内，紫外增色效应会出现一个飞跃。紫外吸收值发生跳跃的温度称为DNA的融点。Tm值实际上是目标DNA的一半变性时的温度 Tm与（G+C）含量的关系---经验公式：X%(G+C)=2.44(Tm-69.3)（DNA溶于0.2m