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任务1.2 培养基的配制和灭菌
任务1-2? 培养基的配制和灭菌 微生物细胞的化学组成 微生物细胞主要含有水和固体成分。 固体成分:蛋白质、糖类、脂类、核酸和无机盐等,占15-20%。 水占约80%。 固体成分中碳、氮、氢、氧四种元素约占90%-97%,还有矿质元素磷、铁、铜、锰等。 微生物的营养类型 根据微生物对碳源的要求不同,可将其分为自养菌和异养菌两大营养类型。 自养菌:凡能利用无机碳合成菌体内有机化物的 异养菌:不能利用无机碳而需要有机碳才能合成菌体内有机碳化物的 根据其生命活动所需能量来源不同,可分为光能营养菌和化能营养菌。 前者是从光线中获得能量,后者则从化学物质氧化中取得能量。 因此,根据微生物所需的碳源和能源不同,可将微生物分为光能自养菌、光能异养菌、化能自养菌、化能异养菌等四类。 微生物的营养类型 微生物生长必需的营养物质 一、碳源 定义: 功能: 碳源谱: 二、氮源 定义: 功能: 氮源谱: 三、水 水是细胞维持正常生命活动所必不可少的,一般可占细胞重量的70-90%。 存在状态: 在微生物各种各样的生理活动中必须有水参加才能进行。 四、无机盐 主要功能: 是微生物生长必不可少的一类营养物质,它们在机体中的生理功能主要是作为酶活性中心的组成部分、维持生物大分子和细胞结构的稳定性、调节并维持细胞的渗透压平衡、控制细胞的氧化还原电位和作为某些微生物生长的能源物质等。 主要元素包括磷、硫、钾、镁、钙、钠等。 微量元素包括锌、锰、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。 在配制培养基时,首选加入磷酸氢二钾和硫酸镁,基本时可以同时提供4种需要量最大的元素。 五、生长因子 定义: 种类: 根据生长因子的化学结构和它们在机体中的生 理功能的不同,可将生长因子分为维生素、氨 基酸与嘌呤及嘧啶三大类。 作用: 常作为辅酶 来源:可以从酵母膏、玉米浆、麦芽汁、血液或血清中获得。 微生物对营养物质的吸收方式 一、 单纯扩散 (被动扩散) 指细胞膜在无载体蛋白参与下,单纯依靠物理扩散方式让许多小分子、非电离分子被动通过的一种物质运送方式。 主要有氧、二氧化碳、乙醇和某些氨基酸分子。 二、促进扩散 指溶质在运送过程中,必须借助存在于细胞膜上的底物特异载体蛋白的协助,但不消耗能量的一类扩散性运送方式。 促进扩散与被动扩散的主要区别在于: 通过促进扩散进行跨膜运输的物质需要借助于载体的作用才能进入细胞.而且每种载体只运输相应的物质,具有较高的专一性。 三、主动运输 指一类须提供能量并通过细胞膜上特异性载体蛋白构象的变化,而使膜外环境中低浓度的溶质运入膜内的一种运送方式。 四、基团转移 指一类既需特异性载体蛋白的参与,又需耗能的一种物质运送方式,其特点使溶质在运送前后还会发生分子结构的变化,因此不同于一般的主动运送。 运送对象举例:葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等。 * * 大肠杆菌 有机物 有机物 化能异养型 硫杆菌 无机物 二氧化碳 化能自养型 红螺细菌 光能 有机物 光能异养型 蓝细菌 光能 二氧化碳 光能自养型 代表菌 能源 主要(或唯一)碳源 营养类型 外界环境的营养物质只有被微生物吸收到细胞内,才能被微生物分解与利用,微生物生长过程中产生的一些代谢产物也必须分泌到细胞外,在这两个过程中,细胞膜起着重要作用。 目前一般认为,营养物质主要以单纯扩散、促进扩散、主动运输和基团转位四种方式通过微生物细胞膜。 ATP ADP + Pi 恢复 原构像 再循环 耗能构像 改变 膜上 膜外 膜内 移位 结合 1 2 主动运输特点: 被运送的物质可逆浓度梯度进入细胞内 要消耗能量,必需有能量参加。 有膜载体参加,膜载体发生构型变化。 被运送物质不发生任何变化。
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