橡皮树克隆苗开放培养的研究.docVIP

橡皮树克隆苗开放培养的研究 陈晨 陈礼彬（新源中学初二学生，上海200062） 指导教师：周建中（普陀区青少年中心，上海200062） 朱小颖（新源中学，上海200062） 提要：对橡皮树无根试管苗后期进行开放培养，让它在有菌的环境中，在简单的营养条件（自来水或加少量的无机盐，琼脂）下，通过简便的实验方法，获得健壮的橡皮树生根小植株。用这种方法可缩短成苗周期、降低成本，且可增强移栽苗的适应能力。 关键词：橡皮树 开放培养 无菌培养 生根率 植株高度 橡皮树（Ficus elastica）别名印度榕、印度胶树，是一种桑科植物。常绿植物，全株光滑，有乳汁。叶宽大具长柄，厚革质，亮绿色，长椭圆形或矩圆形，前端渐绿，边全缘。园林栽培的变种有：金边橡皮树（Var. aureo-marginatus 叶片具有金黄色边），花叶橡皮树（Var. variegata 叶面具有金黄色斑纹）由于其独特的叶片造型，光亮的色泽，正日益成为盆栽观叶植物及露天栽培风景树、行道树，深受人们的喜爱，因而具有极高的观赏价值（1）。 园艺生产中，常通过植物克隆无菌培养技术在短时间内获得大量的、无病毒小植株。我们知道许多试管苗在培育的过程中，在不同程度上，会经历一个外植体的诱导、分化、增殖、生根、试管苗的移栽阶段。在大规模无菌生产中，工人们往往根据需要先生产出大量增殖无根试管苗，然后再将无根苗转入另一种生根培养基中获得完整小植株，最后进行移栽方可出售。这样在整个生产中，虽然要比常规种植（依靠种子、扦插等繁殖方法）速度快，但仍需要一定的周期，且移栽的成活率不是很高。本次实验的目的，旨在能否在植物无菌培养的某一阶段，提前进入到一个有菌的环境下，用最简单的营养条件及实验方法完成生根过程，以期达到在无菌条件下培养的效果。这样可以缩短生产周期、降低成本、增强移栽苗的适应能力。这就是周根余教授提出的开放培养技术（2）。 材料与方法 1材料 橡皮树无根试管苗，见图1。 2开放培养基的配置方法 直接用自来水或加入适量无机盐,调至一定的pH值,再与琼脂 9g/l 混合，微波炉溶解后分装于培养盒中即可。培养基如图2所示。 3培养基的选取 3.1无机盐浓度对橡皮树无根克隆苗开放培养的影响 选用MS基本培养基 3 中的大量元素作为无机盐来源 简称ms ，配成无机盐浓度分别为0ms、1/8ms、1/4ms、1/2ms、1ms、2ms的6个组合。（注：MS中的大量元素的浓度 配比为：硝酸氨1650㎎/l、硝酸钾1900㎎/l、氯化钙·2水440㎎/l、硫酸镁·7水370㎎/l、磷酸二氢钾170㎎/l） 4 3.2 PH值对橡皮树无根克隆苗开放培养的影响 在第一个实验的基础上，取实验结果较好无机盐培养基，配成PH值分别为3、4、 5、6、7、8、9的7个组合。 3.3 橡皮树克隆苗的开放培养与无菌培养的比较实验 配制0 ms、1/8 ms，PH均为7的开放培养基；配制1/2 MS（基本培养基）和1/2 MS（基本培养基）+IBA0.5㎎/ l的无菌培养基。 注：制备无菌培养基时，添加蔗糖30g/L、琼脂8g/L，pH为5.8~5.81，并在121 摄氏度、 20分钟下高压灭菌。 4培养条件 开放培养材料在室温15摄氏度以上的教室内培养；无菌材料在无菌室中，室温为25摄氏度左右下进行培养。所有材料光照时间为10小时/天。 结果与分析 1 不同无机盐浓度对橡皮树克隆苗开放培养的影响 取高度为2㎝—2.5㎝橡皮树无根试管苗，保留4片叶子，平均接种于6组不同无机盐浓度的开放培养基中，一个月后观察实验结果，见表1。 表1 不同无机盐浓度对橡皮树克隆苗开放培养的影响 无机盐浓度 新叶数 片/颗 腐叶数 片/颗 生根数 根/颗 根长 厘米/颗 生根率% 成活率 % 植株高度 厘米/颗 0ms 0.8 0 3.2 1.6 100 100 3.12 1/8ms 1.1 0.2 3.7 2.43 100 100 2.67 1/4ms 0.8 0.6 3 0.755 80 90 2.27 1/2ms 1 0.5 2.2 0.58 80 90 2.32 ms 0.3 1 0.7 0.1 30 60 1.02 2ms — — — — 0 0 — 注：“—”为不计数 ；斜体数字为每列最佳数据；每组实验材料数为10颗 表1的结果表明：0ms、1/8ms的无机盐浓度对橡皮树无菌苗开放培养有利，它们的综合生长指标都优于其它各组，1/8ms较0ms无机盐浓度中生长的植物在生根状况和新叶数的项目上略有优势；而在植株高度方面0ms优于1/8ms。这说明不加或加少量的无机盐都能促使橡皮树试管苗在外界有菌的环境下生长，尤其是表现在生根方面，见图3。2ms中的培养效果最差，全部死亡，这证明了无机盐浓度越高，对于