精氨酸激酶(AK)的提取与纯化2010114020208朱景鹏课件.doc

精氨酸激酶（AK）的提取与纯化 报告题目 精氨酸激酶（ＡＫ）的提取与纯化 作者姓名 徐青龙 班级学号 1005/2010114020208 指导教师 汪劲松 完成时间 2013年10月 生物学实验教学中心 目录 １引言 1 1.1 精氨酸激酶（AK） 1 1.2 亲和层析法 2 1.3 电泳法 2 1.4 本实验主要工作 3 2.1实验用品 3 2.1.1实验材料 3 2.1.1实验试剂 3 2.1.2仪器设备 4 2.2方法 5 2.2.1活化菌种 5 2.2.2 扩大培养 5 2.2.3 IPTG诱导AK基因的表达 5 2.2.4 蛋白质提取 5 2.2.5蛋白质的检测 6 2.2.6 His-tag Ni亲和层析法纯化融合蛋白 6 3 结果与分析 7 3.1蛋白质层析图谱 7 3.2 AK诱导表达电泳图 8 4总结 9 参考文献 10 致谢 10 精氨酸激酶（AK）的提取与纯化 朱景鹏 （指导老师：汪劲松） （湖北师范学院生命科学学院 生物科学1005班 湖北 黄石435002） 摘要：精氨酸激酶（ATP：N-精氨酸磷酸转移酶EC2.7.3.3）存在无脊椎动物中，是参与细胞代谢的磷酸激酶。本实验采取含有包含AK基因的重组质粒的表达菌体E. coli Rosetta ，在含有 50 μg/ml 的卡纳霉素的LB 培养基中