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生物化学之基因信息传递
成肽的反应过程 3. 转位 转位是在转位酶的催化下,核蛋白体向mRNA的3′-端移动一个密码子的距离,使mRNA序列上的下一个密码子进入核蛋白体的A位、而占据A位的肽酰-tRNA移入P位的过程。 转位需要延长因子EF-G参与。 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 成肽→转位→下一轮进位 进位 转位 成肽 肽链合成延长(核蛋白体循环)过程 (三)终止 指核蛋白体A位出现mRNA的终止密码子后,多肽链合成停止,肽链从肽酰-tRNA中释出,mRNA、核蛋白体大、小亚基等分离的过程。 终止阶段需要释放因子RF-1、 RF-2和 RF-3参与。 原核肽链合成终止过程 多聚核蛋白体的形成可以使蛋白质生物合成以高速度、高效率进行。 (四)多聚核蛋白体(polysome) 1条mRNA模板链都可附着10~100个核蛋白体,这些核蛋白体依次结合起始密码子并沿5′→3′方向读码移动,同时进行肽链合成,这种mRNA与多个核蛋白体形成的聚合物称为多聚核蛋白体(polysome) 。 多聚核蛋白体 电镜下的多聚核蛋白体 二、真核生物的肽链合成过程 (一)起始 1. 核蛋白体大小亚基分离; 2. 起始氨基酰-tRNA的结合; 3. mRNA在小亚基定位结合; 4. 核蛋白体大亚基结合。 Met 40S 60S Met Met 40S 60S mRNA eIF-2B、eIF-3、 eIF-6 ① elF-3 ② GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ ATP ADP+Pi elF4E, elF4G, elF4A, elF4B,PAB ③ Met Met-tRNAiMet-elF-2 -GTP 真核生物翻译起始复合物形成过程 真核生物肽链合成的延长过程与原核生物基本相似,但有不同的反应体系和延长因子。 另外,真核细胞核蛋白体没有E位,转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 (二)延长 (三)终止 真核生物翻译终止过程与原核生物相似,但只有1个释放因子eRF,可识别所有终止密码子,完成原核生物各类RF的功能。 原核生物与真核生物肽链合成过程的主要差别 原核生物 真核生物 mRNA 一条mRNA编码几种蛋白质(多顺反子) 一条mRNA编码一种蛋白质(单顺反子) 转录后很少加工 转录后进行首尾修饰及剪接 转录、翻译和mRNA的降解可同时发生 mRNA在核内合成,加工后进入胞液,再作为模板指导翻译 核蛋白体 30S小亚基+50S大亚基 ? 70S核蛋白体 40S小亚基+60S大亚基 ? 80S核蛋白体 起始阶段 起始氨基酰-tRNA为fMet-tRNAfMet 起始氨基酰-tRNA为Met-tRNAiMet 核蛋白体小亚基先与mRNA结合,再与fMet-tRNAfMet结合 核蛋白体小亚基先与Met-tRNAiMet结合,再与mRNA结合 mRNA中的S-D序列与16S rRNA 3?-端的一段序列结合 mRNA中的帽子结构与帽子结合蛋白复合物结合 有3种IF参与起始复合物的形成 有至少10种eIF参与起始复合物的形成 延长阶段 延长因子为EF-Tu、EF-Ts和EF-G 延长因子为eEF-1α、eEF-1βγ和eEF-2 终止阶段 释放因子为RF-1、RF-2和RF-3 释放因子为eRF 中心法则 (the central dogma) 1958年,F. Crick把遗传信息的传递方式归纳为中心法则; 1970年,H. Temin发现逆转录现象,补充中心法则 第一节蛋白质生物合成体系 Protein Biosynthesis System 基本原料:20种编码氨基酸 模板:mRNA 适配器:tRNA 装配机:核蛋白体 主要酶和蛋白质因子:氨基酰-tRNA合成酶、转肽酶、起始因子、延长因子、释放因子等 能源物质:ATP、GTP 无机离子:Mg2+、 K+ 蛋白质生物合成体系 一、mRNA是蛋白质生物合成的直接模板 mRNA的基本结构 Start of genetic message Cap End Tail 5’-端非翻译区 5? 3? 3’-端非翻译区 开放阅读框架 从mRNA 5?-端起始密码子AUG到3?-端终止密码子之间的核苷酸序列,称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 原核生物的多顺反子 真核生物的单顺反子 非编码序列 核蛋白体结合位点 起始密码子 终止密码子 编码序列 PPP 5? 3? 蛋白质 PPP mG - 5? 3? 蛋白质 AAA … 遗传密码 在mRNA的开放阅读框架区,以每3个相邻的核苷酸为一组,代表一种氨基酸(或其他信息),这种三联体形式的核苷酸序列称为密码子。 起始密码子(ini
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