章11 微生物鉴定岗位.pptVIP

岗位描述 该岗位的任务是利用不同微生物对外界物质不同的代谢作用和所产生代谢产物的不同，进行微生物的鉴定和分型，提供疾病的辅助诊断、疗效评估、预后判断及药品、食品、化妆品菌检判断所需的重要生物学参数。该岗位的从业人员除了要有微生物培养、接种技术外，还必须具备一定的微生物生物化学知识，能根据一定的生化反应现象进行结果判断。 空白对照 伤寒杆菌 大肠杆菌 吲哚试验 甲基红试验 V-P试验 枸橼酸利用试验 硫化氢试验 IMVC试验 试验用途： 常用于大肠杆菌和产气杆菌的鉴别。 二、常用的生化反应试验 IMVC试验 大肠杆菌与产气杆菌鉴别结果： + + — — 产气杆菌 — — + + 大肠杆菌 C V M I 二、常用的生化反应试验 （六）、硫化氢试验 试验用途： 常用来鉴别肠道杆菌的种类： 如:沙门菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌 属、爱德华菌属为阳性 大肠杆菌、产气杆菌为阴性 二、常用的生化反应试验 试验原理： 培养基中的含硫氨酸 沙门菌属 H2S 醋酸铅 硫酸亚铁 黑色 阳性 大肠杆菌产气杆菌 不产生H2S 阴性 ? 所属类型：氨基酸和蛋白质试验 （六）、硫化氢试验 二、常用的生化反应试验 乙型副伤寒杆菌：+ 大肠杆菌：- 阳性 阴性 三、微生物快速检测技术 微生物快速检测法是近年来不断取得进展的一种新型的检测方法，常见的有： 1.快速测试片法 2.选择、鉴定用培养基法 3.生物化学技术 4.微生物快速鉴定和自动化分析系统 （一）快速测试片法 是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定受检样品中微生物的方法。快速检测纸片产品，可以检测乳酸杆菌、沙门菌、葡萄球菌等。 快速检测法与传统检测方法之间的相关性非常好，如用大肠菌群快速检测纸片的特异性和敏感性与发酵法符合率均较高。有些快速检测法中还加入了染色剂、显色剂，增强了菌落的目视效果。 （二）选择、鉴定用培养基法 在培养基中加入特异性的生化反应底物、抗体、荧光反应底物、酶反应底物等，可使目标培养物的选择、分离、鉴定一次性完成。 如生物一梅里埃公司的BP+RPF(兔血浆+纤维蛋白原)培养基，可在24h内鉴定金黄色葡萄球菌。Merk公司的培养基上，大肠杆菌可为墨绿色至紫色菌落，沙门菌为淡绿色至蓝绿色菌落。柠檬酸杆菌和克雷伯杆菌为橙红色至红色菌落，其他肠道菌为无色菌落。 （三）生物化学技术 1.PCR技术 PCR技术采用体外酶促反应合成特异性DNA片段，再通过扩增产物来识别细菌。 优点：灵敏度高，节约了大量时间 缺点：增菌培养基成分和其他微生物DNA对Taq酶具有抑制作用，可能导致检验结果假阴性 2.基因探针技术 利用具有同源性序列的核酸单链在适当条件下互补的原理，采用特异性基因片段制备基因探针来识别细菌。 优点：减少了基因片段长度多态性所需要分析的条带数 缺点：不能鉴定目标菌以外的其他菌 （四）微生物快速鉴定和自动化分析系统 1.微量多项试验鉴定系统 也称为数码分类鉴定法和简易诊检技术，基本原理是通过数学的编码技术，将细菌的生化反应模式转换成数学模式，给每种细菌的反应模式赋予一组数码，建立对应的数据库或编成检索本。其计算步骤分为出现频率的计算、对照检索本数据谱得出结果、结果解释三个部分。 （四）微生物快速鉴定和自动化分析系统 2.自动化的微生物鉴定系统 （1）半自动化细菌鉴定 1. BBL?Crystal半自动细菌鉴定系统 2. AutoScan-4半自动细菌鉴定系统 3. VITEK-ATB半自动细菌鉴定系统 4. AutoReader半自动细菌鉴定系统 （四）微生物快速鉴定和自动化分析系统 2.自动化的微生物鉴定系统 （2）全自动化微生物鉴定 1. VITEK?AMS系统 2. MicroScan系统 3. PHOENIXTM?系统 4. Biolog系统 （四）微生物快速鉴定和自动化分析系统 3.使用自动化鉴定系统的注意的问题 1.自动化鉴定系统自身数据库资料有待完善 2.用户应及时更新鉴定系统数据库 3.将自动化鉴定仪的结果和细菌的其他生物性状（如标本来源、菌落特征及其它的生理生化特征）进行核对，尽量避免错误的鉴定。 【知识检测】 1.对鉴别细菌有意义的细菌代谢产物是 A.维生素 B.色素 C.侵袭性酶 D.抗生素 E.毒素 2.内毒素的毒性部位在