第6章 免疫沉淀试验.ppt

1.2%巴比妥琼脂糖约55℃，加入适量抗血清，混匀后制板，打孔，孔内加待测样品，样品孔放负极侧， 6h后观察琼脂板上沉淀峰，绘制标准曲线，求出待测样品浓度。 技术要点 （二）火箭免疫电泳 第三节 凝胶内免疫沉淀试验 可溶性抗原和相应抗体在凝胶中扩散，形成浓度梯度，在抗原抗体相遇并且浓度比例适当的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。 原　理 反应介质：凝胶 凝胶的特点： 1、固相的液体 2、多孔的网状结构 3、Ag-Ab复合物网络在凝胶中 原理：抗体与待测的抗原,在两者比例合适的部位结合形成沉淀环。环的大小与抗原的浓度成正相关。 技术要点： 1.制板 2.打孔 3.加样 4.扩散 5.绘制标准曲线 定量试验 一、单向免疫扩散试验 倾注平板　打孔　加样　 放置37℃　24～48h观察沉淀环 一、单向免疫扩散试验 　　 T1为16-24h；T2为24-48h；T3为48h以上,可见T3为直线，T1为反抛物线 　　 t1为16-24h；t2为24-48h；t3为48h以上,可见t1为直线，t3为反抛物线 Mancini曲线 Fahey曲线 待检蛋白质抗原须具备的条件 仅针对某待测抗原的单价特异性抗血清 已知含量的标准品 待测品含量在1.25?g/ml以上 单向扩散试验 上排为5个不同浓度的参考品； 下排为患者血清，下排右2为异常病理血清 一、