实验三 组织分离法 2.pptVIP

实验三 组织分离法 组织分离法（离析法） 组织分离法：是利用物理（机械）的方法或化学的方法（如药品或者酶的作用）把生物细胞间的胞间层溶解，使生物组织间的细胞分离开来，从而得到单个完整细胞，以便在显微镜下观察细胞的立体形态结构。 缺点：由于组织的细胞间彼此分离，细胞间的关系无法显示，也就不可能了解整个组织的结构。 一、实验目的 学习物理（机械）分离制片方法； 学习化学分离制片方法。 二、实验材料及用品 实验材料：叶片（新鲜和固定）、南瓜茎。 实验用具：载、盖玻片；显微镜；镊子；离心机等。 实验药品：蒸馏水、梯度酒精、 ?二甲苯+ ?纯酒精，Naocl， ? 10%铬酸+ ?10%硝酸离析液，二甲苯，I-KI染液，1%番红水溶液，1%番红酒精溶液、加拿大树胶。 三、实验步骤（一）——表皮制片步骤 临时装片法 选材 撕取下表皮 染色 封固 镜检 三、实验步骤（一）——表皮制片步骤 永久制片法 选材 固定（FAA固定液，24h） 清洗 Naocl 撕取下表皮 染色（1%番红水溶液 30min-1.5h） 水洗（洗去浮色，一次即可） （I-KI染色） 分色（用盐酸水） 水洗（洗去酸液） 粘片、烘片 脱水（50%，70%，80%，95%，100%， ?二甲苯+ ?100%酒精，各2min） 透明（二甲苯） 封固 镜检 三、实验步骤（二）——离析制片步骤 取材 加热 离析（10%铬酸：10%硝酸=1:1 离析液） 水洗 染色（1%番红的50%酒精溶液 4-24h或更长） 水洗（7%AL，1-2次） 脱水 （50%， 70%， 85%，95% AL 各5min，100%AL，两次，每次5min） 透明 （?二甲苯+ ?100%酒精，二甲苯 各5min） 封藏 四、实验结果 表皮制片：表皮细胞的形态？气孔器的类型？ 离析制片：南瓜茎的导管及木纤维形态？ 五、作业 实验完毕，每人交制好的永久玻片标本2片，在标签纸写上玻片名称及自己的姓名和日期； 实验报告（姓名和日期） 试比较各种不同方法所制玻片的质量。 * * 新鲜材料，靠近中脉部分 1 （I-KI染色2min） 加盖玻片 置载玻片，加一滴水，充分展开 靠近中脉部分 染色期间观察如染色液干涸，再滴加 载玻片上滴一滴蛋白黏贴剂，期间加入一滴水，移入叶表皮，水分吸干后放入烘箱烘干 2 3 4 5 放入30-40度温箱，周边泛白 将茎切成1cm长，撕成细丝状 离析液为材料的20倍，30-40℃的温箱中24-48h 水洗数次，在离心管中进行 气孔器 气孔器类型 无规则型 不等型 平列型 横列型 离析法 杨茎的木纤维和导管分子 * * *