实验三__红细胞和白细胞计数.pptVIP

红细胞和白细胞计数 血细胞 (45%) 血浆 (55%) 红细胞 白细胞 血小板 中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞 固体成分 (8～9%) 水(91～92%) 血浆蛋白 非蛋白类 无机盐 纤维蛋白原 清蛋白 球蛋白 血 液 血 清 血 浆 全 血 一、红细胞计数 目的 掌握显微镜手工计数的方法。 原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，冲入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数。 一、红细胞计数 器材 显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球 试剂 生理盐水 标本 EDTA抗凝血 2 为红细胞计数区域 压线细胞的计数原则： 数左不数右，数上不数下 * 操作 1 加稀释液 取小试管1支，加红细胞稀释液2ml。 2 加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10μl，擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管2～3次，立即混匀。 3 充池 混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数池，室温下平放3～5分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。 4 计数 用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。 5计算 红细胞/L=N×25/5×10×106×200=N×1010 =N/100×1012 充液位置 充液位置 注意事项 1. 将红细胞稀释液充入计数池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。 2. 红细胞在计数池中若分布不均，每个中方格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。正常数值范围内，2次红细胞计数相差不得超过5%。 二、白细胞计数 目的 掌握显微镜白细胞计数的方法。 原理 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算求出每升血液中的白细胞数。 器材 显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球 试剂 白细胞稀释液 标本 EDTA抗凝血 二、白细胞计数 1.加稀释液 用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。 2.加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20μl，擦去管外余血，轻轻加至白细胞稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管2～3次，混匀。 3.充池 混匀后用微量吸管将完全变为棕褐色的细胞悬液冲入计数池，室温下平放3～5分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。 4. 计数 用低倍镜依次计数4个大方格内的白细胞数。 5.计算 红细胞/L=N/4×10×106×20=N/20×109/L 操作 五. 计算 WBC/L＝所数WBC总数/4 ＝所数WBC总数/20×109 ×10 ×20 ×106 1.在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。 2.白细胞在计数池中若分布不均，大方格间细胞计数相差一般不超过10%。 3.白细胞数量过多时，可采取加大稀释倍数的方法。 4.白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，它可使白细胞计数偏高，此时应计算白细胞校正值。 注意事项 作业 1.本次实验的关键环节是什么? 2. 假定某次白细胞计数为6×109/L，其中分类100个白细胞有20个有核红细胞，问白细胞的实际数量是多少 二、白细胞计数