黑龙江大学酶制剂答案.docVIP

一、名词（本大题共5小题，每小题4分，总计20分） 1、酶蛋白的分子量较大，至少有一万道尔顿，但并非每个氨基酸对酶催化功能都一样重要（1分），有些氨基酸相对不太重要，他可以被其他特定氨基酸代替甚至缺失（2分），对酶的活性没有影响或者影响很小（1分），此类氨基酸被成为可变氨基酸。 2、活性部位：酶分子中直接与底物结合（2分），并和酶催化作用直接有关的部位（2分）。 3、离子键结合法：是指通过离子键（1分）将酶（1分）结合到具有离子交换基团（1分）的非水溶性载体（1分）上的方法，载体有离子交换树脂等。 4、酶催反应速度：是用单位时间（1分）内底物（1分）的减少量（1分）或产物的生成量（1分）来表示。 5、酶的提取：是指在一定的条件下（1分），用适当的溶剂（1分）或溶液处理含酶原料（1分），使酶充分溶解到溶剂或溶液中的过程（1分）。也称为酶的抽提。 二、填空题（本大题共5小题，每空1分，总计10分） 1、分子内催化 分子间催化 2、粗蛋白质 部分纯化 均质酶 3、盐溶现象 4、固体培养基 液体培养基 5、可逆性抑制 不可逆性抑制 三、选择题（在每个小题四个备选答案中选出一个正确答案，填在题末括号里）（本大题共5小题，每小题2分，总计10分） ACBDD 四、简答题（本大题共5小题，每小题5分，总计25分） 1、写出其中五个即可 氧化还原酶 Oxidoreductase 转移酶 Transferase 水解酶 hydrolase 裂合酶 Lyase 异构酶 Isomerase 合成酶 Ligase or Synthetase 2、固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固定化细胞. 类型：微生物细胞、植物细胞、动物细胞（1分） 生理状态：死细胞（完整细胞、细胞碎片、细胞器） 活细胞（增殖细胞、静止细胞、完整细胞）（1分） 形状：颗粒状、块状、条状、薄膜状或不规则形状。 最多使用：颗粒状珠体（1分） 使用周期：理论上讲，固定化增殖细胞保持了细胞原有的全部活性，只要载体不解体，不污染就可以长期使用（2分）。 3、 Km是酶的一个特征性常数：也就是说Km的大小只与酶本身的性质有关，而与酶浓度无关。（1分） Km值还可以用于判断酶的专一性和天然底物，Km值最小的底物往往被称为该酶的最适底物或天然底物。（1分） Km可以作为酶和底物结合紧密程度的一个度量指标，用来表示酶与底物结合的亲和力大小。（1分） 已知某个酶的Km值，就可以计算出在某一底物浓度条件下，其反应速度相当于Vmax的百分比。（1分） Km值还可以帮助我们推断具体条件下某一代谢反应的方向和途径，只有Km值小的酶促反应才会在竞争中占优势。（1分） 4、（1）种类多，并可根据需求筛选最佳的产酶菌株；（1分） （2）繁殖快，利于生产进行；（1分） （3）培养易，生产成本经济；（1分） （4）可操控，连续化、自动化降低生产成本；（1分） （5）能改良，微生物具有很强的适宜能力，可通过遗传变异手段培育新的、更好的菌株，增加产品开发；（1分） 5、其一是当温度升高时，与一般化学反应一样，反应速度加快（2分），这种影响可以用反应的温度系数来衡量。其二是由于酶的本质是蛋白质，因此随着温度逐渐升高，酶蛋白会因逐渐变性而失活从而导致酶促化学反应速度下降（2分）。在不同温度条件下进行某种酶促化学反应，然后将所测得的酶促反应速度相对于温度来作图，即可得到如图所示的钟罩形曲线。从该曲线我们可以看出，在较低的温度范围内，酶促化学反应速度随温度升高而增大，但在超过一定温度后，酶促化学反应速度不见上升反而下降，因此只有在某一温度条件下，酶促化学反应速度达到最大值，通常把这个温度称为酶促化学反应的最适温度 optimum temperature 。在一定条件下每种酶都有其催化反应的最适温度。（1分） 五、论述题（本大题共2小题，第一题7分，第二题8分，总计15分） 1、1． 酶本身的变化（1分），主要是由于活性中心的氨基酸残基、高级结构和电荷状态等发生了变化。（2分） 2. 载体的影响（1）分配效应（2）空间障碍效应（3）扩散限制效应（2分） 3.固定化方法的影响：吸附法、包埋法、共价键结合法、交联法（2分） 2、当核糖体沿特异性mRNA进行翻译生产蛋白酶时可以结合在mRNA上形成多聚核糖核蛋白体（2分），这种多聚核糖蛋白体可以与待分离基因表达产物制备的特异性抗体结合，（2分）形成多聚核糖体-抗体复合物。这种复合物数量很少，不能从细胞质中分离出来。（1分）如果再加入由特异性抗体产生的第二抗体就可以通过梯度密度离心，将所要的含有特定mRNA的多聚核糖体-抗体复合物从总多聚核糖体中分离出来；（1分）再通过酚氯仿抽提将蛋白质杂质出去，oligo-dT柱层析，将所需要编码蛋白的mRNA分离出来；在进