美国巨日花粉对Raji肿瘤细胞株的抑制作用研究(精选).docVIP

美国巨日花粉对Raji肿瘤细胞株的抑制作用研究 蒋　滢 　冯树一　 黄美英　 蒋菊香 苏州医学院 摘要　美国巨日花粉是一种完全营养食品。研究美国巨日花粉对Raji肿瘤细胞株的抑制作用,结果: 1 破壁花粉中游离氨基酸组成基本与1640培养基相似; 2 花粉水提取液对Raji肿瘤细胞株有明显的抑制作用。 关键词　美国巨日花粉 Raji肿瘤细胞株　天门冬酰胺 花粉是一种营养素完全而平衡的天然营养品已无可异义了,但花粉对肿瘤细胞有无抑制作用,至今议论纷纷。本文采用Raji肿瘤细胞株培养,研究美国巨日花粉对肿瘤细胞生长的抑制作用。 1　材料及方法 1.1　材料 1.1.1　细胞株:选用了Raji肿瘤细胞株,是本院病理生理教研室提供。 1.1.2　人工培养基:为1640培养基+小牛血清 1.1.3　破壁花粉水提取液:花粉由深圳市巨日商贸有限公司提供,然后经破壁,水提取。以花粉为1,用7及14倍水稀释成1∶7及1∶14的两种水提取液。 1.2　方法 1.2.1　1640培养基及美国巨日花粉 1∶7 的提取液,分别使用丹酰氯 1-Dimethylamino-naphtha-lene-5-sulfonyl cholride, DNS-Cl 荧光标记氨基酸,聚酰胺薄膜层析方法[1-2],分离游离氨基酸的组成及测定其含量。 1.2.2　细胞培养,将Raji肿瘤细胞等量分装2-3瓶,其中一瓶为1640培养基,另一瓶用1/2巨日花粉 1∶7 的水提取液或花粉 1∶14 的水提取液和1/2 1640培养基,然后进行连续培养,隔日镜下观察Raji肿瘤细胞生长情况。 2　结果及讨论 2.1　结果 2.1.1　1640培养基及巨日花粉 1∶7 水提取液中 游离氨基酸的组成及其含量见表1 表1　1640及美国巨日花粉中游离氨基酸含量 Table 1　Content of Free Amino Acid Contentin 1640 and pollen mg/L 氨基酸 1640培养基 花粉 1∶7 提取液 Arg 200 113 Asn 50 0 Asp 20 218 Cys 50 2 Glu 20 247 Gln 300 200 His 15 55 Gly 10 122 Hyp 20 0 Ile* 50 120 Ieu* 50 170 Iys* 40 178 Met* 15 56 Phe* 15 102 Pro 20 193 Ser 30 91 Thr* 20 97 Trp* 5 0 Tyr 20 88 Val* 20 129 *为人体八种必需氨基酸; Gln 谷胺酰胺 分别加至300 mg/L及200 mg/L。 表1说明巨日花粉 1∶7 提取液中,除天门冬酰胺 Asn 、羟脯胺酸 Hyp 、色氨酸 Trp 未测出外,其余七种必需氨基酸的含量均高于1640。 用巨日花粉 1∶7 水提取液与纯1640培养基分别连续培养Raji肿瘤细胞株,通过两次对比试验观察细胞数量和细胞活力,其结果列于表2 表2　美国巨日花粉 1∶7 液与1640培养基培养对Raji肿瘤细胞株试验 Table 2　The Continual growth of Raji tumor cell in 1640medium and in solutiionof pollen 1∶7 次数 日期 1640培养基 2ml 1640∶花粉 1∶1 1∶1 ml 细胞数/万/ml 细胞活力/% 细胞数/万/ml 细胞活力/% 1 7月8日 80 98 80 98 1 7月10日 101 98 42 90 1 7月12日 65 92 26 65 1 7月14日 53 89 16 35 1 7月16日 54 60 15 25 1 7月18日 108 92 8 11 2 7月20日 80 100 80 100 2 7月22日 80 98 70 97 2 7月24日 86 98 25 85 2 7月26日 90 99 24 67 2 7月28日 99 98 2 2 表2说明：通过二次连续观察Raji肿瘤细胞株生长情况,说明1/2 1640+1/2美国巨日花粉 1:7 溶液对Raji肿瘤细胞生长有明显的抑制作用。 分别用美国巨日花粉 1∶7 及巨日花粉 1∶14 与单纯1640培养基进行一次对比连续培养,结果于表3。 表3　美国巨日花粉 1∶7 和花粉 1∶14 液与1640培养基对Raji肿瘤细胞培养 Table 3　The growth of Raji tumor cell in 1640 medium and in solution of pollen 1∶7 1∶14 日期 1640液 2ml 1640∶