榄香烯联合替莫唑胺对胶质瘤细胞增殖抑制作用研究.pdfVIP

』黜聃掣 目 录 Contents AbstractinChinese………．………． in Abstract English………．…………．．……．……………………··………………………………·……．．j 1IntrOduction………………．……………………………………．．．．…．…．……．…………………………．5 1．1Background………………………………………………………………………………………………·-5 1．2Objective……………………………………………………………………………………………………7 1．3Coments……………………………………………………………………………………………………·8 andMethods．…．…．…………………………………………．．……………………………．8 2Materials 2．1Materials………………………………………………………………………………………．…………．．8 2．2Methods．…．．．．．…．．．…．…………………．．．．…………………．…．………………．．………………．…一10 3ResuIts…………．………………………………………………．．…………．……．…．…．……………．．．．．·13 4Discussion………………………………………．………………………．………．………………………·．19 5ConcIusions……………………．…．…．……………………………………………………．……………．23 References………………．……．…．………．………．…．…………………………………．…………………25 Review…………………………………………………………………………………………………………·33 forReview……………………………………………………………………………………41 References Appendix research study……………………·50 II：Scientificduringpostgraduate Appendix 榄香烯联合替莫唑胺对胶质瘤细胞增殖抑制作用的研究 中文摘要 【目的】 1．观察榄香烯 ELE 、替莫唑胺 TMZ 以及联合用药对人胶质瘤细胞株 U87及U87干细胞样细胞 GSLC 增殖抑制的影响； 2．观察榄香烯、替莫唑胺以及联合用药分别对U87及U87GSLC的裸鼠皮 下移植瘤的生长抑制效果： 3．探讨榄香烯联合替莫唑胺抑制U87及U87GSLC增殖的可能机制。 【方法】 1．体外培养人胶质瘤细胞株U87以及U87GSLC，细胞毒性／增殖检测试剂 盒 CCK．8 检测计算榄香烯、替莫唑胺不同浓度单药及榄香烯联合不同浓度替 莫唑胺处理后的细胞增殖抑制率； 2．分别建立U87、U87GSLC的裸鼠皮下移植瘤模型，各类模型分为空白对 组给予药物腹腔注射处理，观察给药后肿瘤生长情况。 3．免疫印迹试验 westernblot 检测榄香烯、替莫唑胺及联合用药后U87 BER 关键蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶l PARP．1 表达水平的变化。 【结果】 1．榄香烯和替莫唑胺均可抑制胶质瘤细胞U87及87GSLC增殖，抗肿瘤作 用具有剂量依赖性，相同药物浓度下，榄香烯对U87GSLC增殖抑制作用较U87 强，而替莫唑胺对U87增殖抑制作用较U87GSLC强，联合用药效果表现为协同 作用。 2．动物实验结果显示，皮下注射U87GSLC组的裸鼠成瘤的时间比注射U87 组 ELE+TMZ组。 3．免疫印迹试验结果示，在U87GSLC中，榄香烯可降低的Notchl的表达， 表达水平与药物浓度负相关，替莫唑胺对Notchl的表达水平无明显影响，固定 胺浓度增加而下调，但在U87中榄香烯、替莫唑胺单药及联合用药对NotchI表 依赖性，而替莫唑胺对PARP一1无明显作用，固定榄香烯浓度联合替莫唑胺用药 可使U87GSLC和U87的PARP．1表达水平随替莫唑胺浓度增加而下调。 【结论】 1．体外实验表明，榄香烯及替莫唑胺均具有抗胶质瘤增殖的作用，榄香烯 对U87GSLC中的生长抑制作用强于U87，提示相比于普通胶质瘤细胞，榄香烯可 能对GSLC具有更高的敏感性，而替莫唑胺在体外细胞实验中表现为对U87敏感 性高于U87GSLC，两者联合应用可提高替莫唑胺抑制胶质瘤细胞及胶质瘤干细 胞样细胞增殖效果，作用效果表现为协同作用。 2．裸鼠体内实验表明：在裸鼠皮下，U87GSLC具有IZU87更强的致瘤能力， 榄香烯对U87GSLC移植瘤模型的肿瘤生长抑制效果好，而替莫唑胺则对U87移植 瘤模型的肿瘤生长抑制作用强，联合用药对肿瘤