选3.2.1.1植物细胞工程的基本技术分析.pptVIP

2.1植物细胞工程 2.1.1 植物细胞工程的基本技术 一、植物组织培养 1、原理： 细胞的全能性 一、植物组织培养 2、植物组织培养的条件 内因：离体细胞、组织或器官 外因： (1）适宜的外界环境条件，例如无菌、适宜的温度、湿度、光照等 (2）培养基（一定的营养物质，激素） 植物组织培养的培养基 无机营养成分：无机盐离子 有机营养成分： ① 含N物质：包括维生素和氨基酸 ② 碳源：2%—5%的蔗糖溶液，调节渗透压 ③ 琼脂：起支持作用 ④ 激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素 PH值：5.0－6.0 一、植物组织培养 3、 植物组织培养的基本过程 外植体 愈伤组织 胚状体已分化出根、芽 愈伤组织的形成 愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种排列疏松无规则、高度液泡化、无定形态的薄壁细胞组成的组织。 植物组织培养（试管苗的形成） 移栽 植物组织培养的概念 植物组织培养的过程 相关问题 植物体细胞杂交过程 思考题 细胞壁如何去除？ 原生质层如何融合？融合的基础是什么？ 杂交完成的标志是什么？ 最后通过什么手段得到新个体 ？ 问题 为什么“番茄—马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样，地上长番茄、地下结马铃薯？ 主要原因是：生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，所以马铃薯—番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达，杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。 问题 自然界中有一种含有叶绿体的原生动物──眼虫，说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活，请探讨：动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？如果理论上可行，请设计出具体实验方案。 * * * * * * * 专题二 细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品(定向改造） 细胞工程 植物细胞工程 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞工程 细胞的全能性 (1) 概念: 已高度分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。 (2) 原因： 生物体细胞含有本物种所特有的全套遗传信息。 (3)全能性高低： ①受精卵＞胚胎干细胞＞生殖细胞＞体细胞 ②植物细胞＞动物细胞 一、 植物组织培养 分化程度降低，分裂能力增强 重新分化出组织器官的过程（细胞分裂素、生长素） 细胞分化程度与细胞分裂能力呈负相关 脱分化 遮光 再分化 光照 试管苗大规模培养 经过炼苗的小苗，可以和一般植物一样进行大规模栽培 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 离体的植物器官、组织或细胞 脱分化（又叫去分化） 愈伤组织（排列疏松而无规则，高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞） 再分化 根或芽等器官 植物体 植物组织培养的条件： 适宜的养料和激素，适宜的温度和无菌条件 1、在植物组培过程中，为什么要进行一系列的消毒，灭菌，并且要求无菌操作？ 2、为什么切取胡萝卜根的形成层，其他部分也能培养成小植株吗？ 3、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养？ 能力训练： 1、下列不能作为植物组织培养的材料是： A、秋海棠的叶 B、马铃薯的块茎 C、成熟的花粉 D、木质部中的导管细胞 D 植物体细胞杂交应用研究 1、定义： 将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，且把杂种细胞培育成新的植物体的过程。 2、优势：（与有性杂交方法比较） 克服了远缘杂交不亲和的障碍，拓展了可用于杂交的亲本组合范围。。 植物体细胞杂交 植物体细胞杂交过程 去掉细胞壁 原生质体融合 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 分化发育 愈伤组织 杂种植株 植物A细胞 植物B细胞 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 融合体 再生壁 杂种细胞 细胞分裂 愈伤组织 杂种植株 去壁的常用方法： 酶解法（纤维素酶、果胶酶等） 原生质体融合方法： 物理法：离心、振动、电刺激等 化学法：聚乙二醇（PEG） 植物体细胞杂交过程示意