心梗、脑梗、心肌损伤分析.pptVIP

心肌梗塞心肌损伤脑梗塞 冠状动脉结扎过程： 大鼠， ip 戊巴比妥钠45 ml/kg麻醉，气管内插管，接人工呼吸机（65次/分， 8-10 ml/次）。连接微电脑生理记录仪，描记正常II导联心电图（ECG）。沿前正中线切开胸骨前皮肤，暴露2-5肋，连同肋骨一起结扎肋下动脉，紧靠胸骨旁左缘处用纯头剪刀剪开5、4、3肋。 暴露心脏，轻捏右胸廓，抵压左胸背部肋骨挤出心脏。找到肺动脉圆椎，拨起左心房（耳）根部。 结扎冠状动脉：用5/0号丝线，在肺动脉圆椎右缘、平左心耳下缘1-2 mm处冠状静脉走行处浅层心肌用小圆针穿线、结扎。记录结扎时间。 将心脏纳入胸腔，缝合切口，停止人工呼吸。 记录ECG，观察S-T段变化。 缺血6 小时时，再次记录ECG。取下心脏，用NBT染色法测心肌梗塞范围，心室内取血，离心制备血清，用比色法测血清乳酸脱氢酶（LDH）含量。 心梗测定指标 心电图（ECG）记录：用微电脑生理记录仪记录结扎前、结扎后10 min、结扎后6 h的II导联ECG,观察S-T段变化。 心肌梗塞范围测定：于结扎后6 h取下心脏，剪去心房，将心室横切为3-4片，立即置0.5% NBT(溶在0.1 mmol/L磷酸缓冲液中， pH 7.4)溶液中，37 ℃ 孵2 min,以拒染部分为梗塞区，蓝染部分为未梗塞区（ 见图1），剪下拒染部分心肌，称重，计算该部分心肌占心室全重的%，作为心肌梗塞范围，如下式： 心肌梗塞范围/%= ×100% 冠状动脉结扎部位 大鼠心梗NBT染色 大鼠心梗ECG变化 心室内压及心室收缩功能曲线  脑缺血模型的复制方法 颈外血管阻断法（ 双侧颈总动脉夹闭， 沙土鼠结扎一例颈总动脉，双侧颈总动脉夹闭加放血,双侧颈总动脉夹闭加一例或两侧椎动脉结扎 ) 颅内动脉阻塞法 主要是大脑中动脉的阻塞(直接暴露大脑中动脉电凝或结扎),穿线法阻断大脑中动脉（0．2mm的尼龙线） 栓子法: 脑表面血管阻塞法 血管周围注射促凝剂 应用光敏剂 MCA解剖 大鼠大脑中动脉（MCA）血栓形成模型 模型制备：大鼠术前禁食12小时。0.3%戊巴比妥钠(30 mg/kg)腹腔注射麻醉。右侧卧位固定，沿左眼外眦与左外耳道连线中点垂直线做一约2 cm纵切口，钝性分离颞肌，咬去颧弓，撑开颞颌关节，在蝶骨大翼处用牙科钻打薄骨质，牙科探针挑去骨片，开一约4 mm×3 mm骨窗，可见大脑中动脉沿嗅束垂直走行。取3 mm长4号手术丝线，浸50%FeCl3 10 μL，将此丝线置MCA嗅束-大脑下静脉之间，即置MCA中段表面，损伤血管诱导血栓形成，每5分钟重置一根，20分钟后除去丝线，用生理盐水洗净创面，缝合皮肤伤口。 指标检测： 神经损伤症状检测：术后待大鼠清醒后及24小时进行脑缺血行为评分，按以下标准进行：尾部倒提时，患侧上肢内收，肩外旋，4分；向对侧推左（右）上肢，患侧抵抗力下降，1-3分；将上肢置金属网上，患侧肌张力下降，1-3分；向患侧旋转，1分。总分11分。 梗塞面积 ：术后24小时将大鼠断头取脑，去除小脑，肉眼可见MCA中段呈黑色，血栓形成。沿冠状面切四刀，切成3 mm厚脑片，将脑片置2%　TTC(红四氮唑）溶液中，37℃温孵30 min染色,用图象分析仪摄像，计算梗死灶(未着色区)面积，脑梗塞面积以梗死灶面积与脑总面积百分比表示。 脑含水量 ：脑片TTC染色摄像后，沿正中矢状线将脑片切为左右两半，取左侧(病变区)及右侧(无病变区)皮质，分别称取左右大脑的湿重，60 ℃ 96　h干至恒重，称干重，计算脑含水量。脑含水量＝（湿重－干重）/湿重×100% 正常MCA位置 氯化铁致右侧MCA血栓形成 异丙肾上腺素诱发大鼠心肌肥厚 SD大鼠，体重136.5±11.2 g，随机分为4组：生理盐水对照组，异丙肾上腺素 (ISO) 组，给药前准确称大鼠体重，麻醉状态下描记大鼠标准导联、单极加压肢体导联及CR和CL胸前导联ECG，将心电图异常的动物剔除，然后ISO组用ISO（0.02 mg/kg）sc，每日2次，共6 wk。给药6 wk时，末次给药24 h后，在麻醉状态下描记心电图，然后迅速剖取心脏，用滤纸拭干血液，称取全心重、心室重、左心室重、右心室重和室间隔重，以上均为湿重，测量右心室壁厚、左心室游离壁厚和室间隔厚，取左心室心尖部分组织做常规病理切片，余左心室组织置4℃冰箱保存，待后供SOD活性和MDA含量测定用。 结果 大鼠心肌肥厚模型中，持续给异丙肾上腺素6周，可使大鼠的心电图J点异常抬高，病检显示大鼠心肌细胞广泛损伤，同时使全心重/体重（hw/bw）、左心室重/体重（lvw/bw）和室间隔重/体重（vsw/bw）增加，左室游离壁和室间隔厚度