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转基因大豆玉米种子植物叶片转基因检测试纸一、转基因大豆玉米种子植物叶片转基因检测试纸简介中国每年进出口大量大豆产品,需要对其转基因成分进行监控,PCR 检测法 是目前国内外检测生物技术产品最常用的方法,但需要的仪器设备价格昂贵,检测周期较长,而转基因大豆玉米种子植物叶片转基因检测试纸是一种快速检测方法,可以满足大豆产品在种植,加工及贸易中的监控需要,实验证明:采用快 速检测试纸条测定大豆转基因含量,测定时间仅需 10min,测定结果准确,与传统 PCR 方法相比,缩短了工作时间,提高了工作效率.转基因食品的安全问题,特别是转基因食品对人及动物的健康,以及对生态环境的影响,一直是人们关注的焦点.2008 年中国从美洲进口3000 吨转基因大豆,出口欧美等国家40多万吨非转基因 大豆,2009 年一季度我国大豆的进出口量呈递增趋势,为加强大豆产品的食品安全管理,需要检验机构 对其进行有效监控。国内外转基因检测主要有三种方法,第一种是以核酸为基础的PCR 检测方法,包括定性PCR,实 时荧光定量PCR,PCR—ELISA 半定量和基因芯片等方法;第二种是检测外源基因的表达产物一蛋白质检测方法分为试纸条ELISA 和蛋白芯片。三种方法是利用红外检测转基因产品化学及空间结构uJ.以核酸为基础的PCR 检测方法,是目前国内外检测生物技术产品最常用的方法,PCR方法具有准确,检测限低,适用范围广的特点,但需要的仪器设备昂贵,检测周期较长,因此需要一种快速检测方法来充实,满足大豆产品在种植,加工及贸易中的监控需要.目前,转基因大豆玉米种子植物叶片转基因检测试纸能较好地对大豆产品进行检测,且检测结果准确,速度快,成本 低,适合快速检测的需要.转基因大豆玉米种子植物叶片转基因检测试纸应用了双抗体夹心法,首先将CP4EPSPS蛋白特异的抗体,偶连于显色试剂,并参入试纸条.当试纸条被插入含有CP4EPSPS 蛋白的植物组织的小量萃取物时,偶连抗体与蛋白之间 就发生了结合,与偶连于显色试剂上的某些但不是全部抗体形成夹心物.膜片含有两个捕获区,一个捕获区可捕获结合的CP4EPSPS 蛋白,另一个捕获区可捕获显色试剂.当夹心物和未反应的显色试剂 被膜片上的特定区捕获时,这些捕获区就显现出红 色.若膜片上仅存在一条红色对照线,便说明受检 样品为阴性样品,若存在两条线,便说明受检样品为阳性样品。托普云农转基因大豆玉米种子植物叶片转基因检测试纸本产品用于快速检测种子或植物叶片等样品中的转基因 Bt Cry1C，灵敏度为 1%，整个检测过程只需要 10-15 分钟，适用于各类企业及检测机构。二、转基因大豆玉米种子植物叶片转基因检测试纸检测原理托普云农转基因 Bt Cry1C 快速检测试纸应用双抗体夹心免疫层析的原理，样本中的抗原在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体 1 结合，形成抗原-抗体复合物，继续向前方流动和 NC 膜检测线上特异性单克隆抗体2 的结合形成双抗体夹心复合物。如果样本中抗原含量大于 1%，检测线（T 线）显红色，结果为阳性；反之，检测线（T 线）不显色，结果为阴性。三、托普云农转基因大豆玉米种子植物叶片转基因检测试纸样品处理植物种子：1、水稻：取 10 粒水稻种子，充分压碎，转移到做好标记的提取管中（注意：充分压碎能够提高测试准确度），加 400μl缓冲液（浓度比例按照 10 粒种子加 400μl 缓冲液进行）,充分溶解。2、玉米：取 2 粒玉米种子，充分压碎，转移到做好标记的提取管中（注意：充分压碎能够提高测试准确度），加 800μl 缓冲液（浓度比例按照 2 粒种子加 800μl 缓冲液进行），充分溶解。3、盖好提取管的盖子，用力上下振荡提取管 20~30 秒，确保样品与缓冲液充分混匀。静置等待固体物质沉淀在管底。4、请注意不要交叉污染，每个样品采用单独的提取管。叶片组织：1、将植物叶片组织置于一次性组织提取管的盖子与管身之间，迅速盖住盖子，重复 2 次，得到 2 片圆形叶片组织。用杵将叶片置于提取管的底部。用记号笔在管壁做好标记。2、将叶片充分捣碎。3、加入 200 μL 样品缓冲液。4、重复碾碎步骤使样品与缓冲液充分接触混合。拿掉杵棒（注意请将杵棒一次性使用，以免不同样品间交叉污染）。三、托普云农转基因大豆玉米种子植物叶片转基因检测试纸使用步骤测试前请完整阅读使用说明书，并将试纸和待检样本溶液恢复至常温。1、从包装袋中取出试纸后请尽快使用；2、将试纸插入提取管中，开始计时；3、结果应在 10-15 分钟内读取，其他时间判读无效；四、转基因大豆玉米种子植物叶片转基因检测试纸结果判断1、阴性（－）：C 线显色，T 线不显色（测试线，靠近加样孔一端）；2、阳性（＋）：C 线显色，T 线显色肉眼可见（测试线，靠近加样孔一端），3、无效