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第五节 酶促反应动力学（ Enzyme Kinetics ） 酶促反应动力学(Kinetics of enzyme-catalyzed reaction ) ： 是研究酶促反应的速率以及各种因素对酶促反应速率的影响，是酶学的一个分支。 一、温度对酶促反应的影响（Effect of temperature） 二、pH对酶促反应的影响（Effect of pH ） pH-酶反应速率曲线与最适pH（optimum pH） 酶浓度与反应速度成正比 四、底物浓度对酶反应速度的影响 Substrate Concentration Affects the Rate of Enzyme-Catalyzed Reactions 四、底物浓度对酶反应速度的影响 1．米氏方程的提出 3. 米式常数（ Km ）的意义 Km 值的物理意义：Km值是酶反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。米氏常数的单位为mol/L。 Km 是酶的一个特征常数： 与酶的浓度无关，只与酶性质有关。 Km受底物、温度、pH的影响，Km值是常数是指对于一定底物在一定温度、pH条件下是一常数。 1/ Km 表示酶对底物的亲和力。 4. Km和米氏方程的实际应用 根据米氏公式可以人为的掌握反应速度v。 根据抑制剂对Vmax 、Km的影响，可推断抑制剂的类型。 有助于寻找一系列不同的酶催化一个代谢过程的连锁反应时的限速步骤。 了解酶的Km值及在细胞内底物的浓度，可推知该酶在细胞内是否受到底物浓度的调节。 Km可以帮助推断某一反应的方向和途径。 5. Km值的求法 根据米氏方程 双倒数作图法 (Lineweaver-Burk) 1.激活剂对酶促反应速度的影响 激活剂（activator） 类型 2．抑制剂对酶促反应速度的影响 抑制作用 inhibition 抑制剂 inhibitor (1)不可逆抑制作用（irreversible inhibition) 抑制剂以共价键和酶分子上必需基团结合（牢固结合），使酶活性降低或丧失，这种抑制剂不能用透析、超滤等物理方法解除抑制作用。 (2)可逆抑制(Reversible Inhibition) 通常以非共价键与酶和（或）酶-底物复合物结合，使酶活性降低或消失。采用透析或超滤等物理方法可将抑制剂除去，使酶恢复活性。 类型： 竞争性抑制（competitive inhibition） 非竞争抑制（ noncompetitive inhibition） 反竞争抑制（ uncompetitive inhibition） 1) 竞争性抑制 2)非竞争性抑制 3)反竞争性抑制 表. 三种抑制作用总结 3. 一些重要的抑制剂及其实际意义 专一作用于酶蛋白活性中心的丝氨酸羟基，使其磷酰化，从而产生不可逆抑制。可抑制蛋白酶和酯酶，特别是强烈抑制胆碱酯酶。 有机砷化合物： 五、化学物质对酶促反应速度的影响 (2)可逆抑制剂：最典型的例子为磺胺类药物。 五、化学物质对酶促反应速度的影响 抗癌药物如阿拉伯糖胞苷、氟尿嘧啶等都是利用竞争性抑制原理设计的药物。 五、化学物质对酶促反应速度的影响 二巯基丙醇 青霉素的分子结构 噻唑啉环 β-内酰胺环的活性肽键 五、化学物质对酶促反应速度的影响 青霉素的作用： 糖肽转移酶 (活性酶) 五、化学物质对酶促反应速度的影响 细菌的叶酸合成需要 对氨基苯甲酸（PABA） 前体 磺胺药类似PABA， 可抑制细菌叶酸的合成 磺胺药 对氨基苯甲酸 L-Glu+喋啶 二氢叶酸 四氢叶酸 对氨基苯磺酰胺 College of Life Sciences * 二 三 四 五 一 温度对酶促反应的影响 pH对酶促反应的影响 酶浓度的影响 底物浓度对酶反应速度的影响 化学物质对酶促反应速度的影响 温度-酶反应速率曲线与最适温度（optimum temperature） Fig. The effect of temperature on enzyme activity. Fig. The effect of pH on enzyme activity. Tab. Optimum pH of some enzymes 胃蛋白酶 过氧化氢酶 胰蛋白酶 延胡索酸酶 核酶 精氨酸酶 三、酶浓度的影响（Effect of enzyme concentration） [S][E] v∝[E] Fig. Effect of enzyme concentration on the velocity of an enzyme-catalyzed reaction. 反应分子数 ： 单分子反