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神经生物学相关论文摘要在MN9D细胞α-synuclein N、NAC、C端结构域与线粒体关系的研究张韬 硕士2009帕金森病（PD）是最常见的神经退行性疾病之一，a-突触核蛋白（a-synuclein）及线粒体与PD发病密切相关，但作用机制尚不明确。a-synuclein是PD病理特征Lewy体的主要成分, a-synuclein基因突变可导致家族性PD，大多数PD患者存在线粒体功能障碍。本课题前期工作证实a-synuclein可位于线粒体，其在大鼠体内长期过表达可引起神经元线粒体结构变化，导致线粒体退行性变。本实验的目的是研究a-synuclein各结构域与线粒体结构功能的关系。我们成功构建了a-synuclein 基因的各结构域：pLNCX2/N，pLNCX2/NAC及pLNCX2/C的逆转录病毒的表达质粒，通过病毒包装获得了可表达a-synuclein各结构域的MN9D细胞。利用免疫细胞化学方法，通过激光扫描共焦显微镜发现a-synuclein/N端与线粒体存在共定位关系；a-synuclein/NAC主要在核内聚集表达；a-synuclein/C端在胞浆和胞核内均有表达。JC1染色流式细胞仪检测显示，过表达a-synuclein/N实验组细胞线粒体膜电位降低，同时CCK8检测结果显示该组细胞活力较正常组及其它处理组明显下降。凋亡检测显示，过表达a-synuclein/N可