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第九章 细胞骨架(Cytoskeleton) 第一节 微丝与细胞运动 一、微丝(microfilament, MF) 又称肌动蛋白纤维(actin filament), 由两条线性排列的 肌动蛋白链(actin)组成、直径为7nm的骨架纤维。 分布：普遍存在于所有真核细胞中，是一个实心状的纤维； 在细胞质膜的内侧和细胞核膜的内侧。 功能：微丝对细胞贴附、铺展、运动、内吞、细胞分裂等许 多细胞功能具有重要作用。 (一) 结构与成分 (二) 微丝的组装及动力学特性 组装条件：ATP、适宜的温度、Mg2+、高浓度K+和Mg2+离子 组装过程：2-3个actin聚集成一个核心（核化）；ATP-actin分子向核心两端加合。微丝具有极性，ATP-actin加到(+)极的速度要比加到(-)极的速度快5-10倍。 溶液中ATP-肌动蛋白的浓度处于临界浓度时，ATP-肌动蛋白在(+)端添加，而从(-)端分离，表现出 “踏车”现象。 体内装配时，MF呈现出动态不稳定性，主要取决于F-actin结合的ATP水解速度与游离的G-actin单体浓度之间的关系。 MF动态变化与细胞生理功能变化相适应。在体内,除肌原纤维、微绒毛等属于永久性的稳定结构外，其他大都处于动态的组装和去组装过程中. 细胞中大多数微丝结构处于动态的组装和去组装过程中，并通过这种方式实现其功能。 细胞松弛素（cytochalasin）可切断微丝纤维，并结合在微丝末端抑制肌动蛋白加合到微丝纤维上，特异性的抑制微丝功能。 鬼笔环肽（phalloidin）与微丝能够特异性的结合，使微丝纤维稳定而抑制其功能。荧光标记的鬼笔环肽可特异性的显示微丝。 影响微丝装配动态性的药物对细胞都有毒害，说明微丝功能的发挥依赖于微丝与肌动蛋白单体库间的动态平衡。这种动态平衡受actin单体浓度和微丝结合蛋白的影响。 二、 微丝网络动态结构的调节与细胞运动 （一）非肌肉细胞内微丝的结合蛋白 已知的的微丝结合蛋白有100多种，分为以下类型： 1．核化蛋白：使游离actin核化，开始组装，Arp 2．单体隐蔽蛋白：阻止游离actin向纤维添加，thymosin 3．封端蛋白：使纤维稳定，结合在（+）或（-）极形成“帽子”，阻止其它单体添加 Cap Z 4．单体聚合蛋白：将结合的单体安装到纤维，profilin 5．微丝解聚蛋白：cofilin 6．交联蛋白：分为成束蛋白和成胶蛋白两类， fimbrin 7．纤维切断蛋白：如溶胶蛋白（gelsolin） 8．膜结合蛋白：如粘着斑蛋白（vinculin） 肌肉细胞内微丝的结合蛋白 肌球蛋白 原肌球蛋白 肌钙蛋白 微丝除参与形成肌原纤维外还具有以下功能： 1．形成应力纤维（stress fiber）：结构类似肌原纤维，都包含myosin II、原肌球蛋白、细丝蛋白filamin和α-actinin。培养的成纤维细胞中具有丰富的应力纤维，并通过粘着斑固定在基质上。使细胞具有抗剪切力。 培养的上皮细胞中的应力纤维（微丝红色、微管绿色） 4. 胞质分裂:有丝分裂末期，两个即将分离的子细胞内产生收缩环，收缩环由平行排列的微丝和myosin II组成。随着收缩环的收缩，两个子细胞的胞质分离 5. 顶体反应: 6. 其他功能：如细胞器运动、质膜的流动性、胞质环流均与微丝的活动有关，抑制微丝的药物（细胞松弛素）可增强膜的流动、破坏胞质环流。 收缩环由大量反向平行排列的微丝组成，其收缩机制是肌动蛋白和肌球蛋白相对滑动。 肌球蛋白：依赖于微丝的分子马达 分子马达的概念 (一) 肌球蛋白（myosin）已知15类（myosin I-XV）。 Myosin II构成肌原纤维的粗丝。由2个重链和4个轻链组成，外观具有两个球形的头和一个螺旋化的干，头部有ATP酶活性。 Myosin V结构类似myosin II，但重链有球形尾部。 Myosin I 由一个重链和两个轻链组成。 Myosin I、II、V都存在于非肌细胞中，II型参与形成应力纤维和胞质收缩环，I、V型结合在膜上与膜泡运输有关 。 ◆ II型肌球蛋白(myosin) 的结构 由2条重链和4条轻链组成，并组成三个结构域 ●头部 含有与肌动蛋白、ATP结合的位点，负责产生力。 ●颈部 颈部通过同钙调素或类似钙调素的调节轻链亚基的结合来调节头部的活性。 ●尾部 含有决定尾部是否同膜结合还是同其它的尾部结合的位点 Myosin II structure Two heavy chains, two essential light chains, and two regulatory light chains Heavy chain has head domain, neck region, an