高级植物生理实验-低温胁迫对小麦生理生化特性的影响分解.docVIP

低温胁迫对小麦生理生化特性的影响 （东北农业大学生命科学学院 哈尔滨 150030） 摘要：本研究以两个冬小麦品种冬麦和济麦为材料，在低温胁迫及恢复处理条件下测定其，用来分析抗寒性不同的冬麦品种在低温胁迫下适应性的差异，结果表明在-10处理下，小麦随处理时间增长，其生理指标有不同程度的升高或降低，随恢复时间增长，其各项生理指标逐渐恢复正常。其中，济麦比冬麦对冷胁迫更加敏感各项生理指标变化幅度均大于冬麦。 关键词：济麦，冬麦，低温胁迫，生化特性 前言 小麦(Triticum aestivum)是我国北方地区的主要粮食作物之一，其种植有较强的地域性，产量受气候和环境条件影响很大。冷胁迫影响小麦几乎所有重要生命过程，因而导致减产或绝收，给粮食生产带来严重威胁，这已经成为影响我国乃至世界农业生产的重大问题。因此了解小麦低温冷害应答的生理过程，是解决低温冷害对小麦生产影响的重要基础。 低温均会导致植物活性氧自由基积累，进而形成氧化胁迫[1,2]。通过调节自身的抗氧化系统，植物可清除活性氧自由基而免受或减少伤害[3]。以抗坏血酸(ASA)为核心的抗氧化系统在植物清除活性氧过程中具有重要的作用[4]。植物ASA代谢途径已较为明确，ASA在抗坏血酸过氧化物酶（APX）作用下氧化生成单脱氢抗坏血酸(MDHA)，MDHA经非酶歧化反应形成脱氢抗坏血酸（DHA）。两者分别通过单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHA)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)、谷胱甘肽还原酶(GR)的作用被还原再生。因此，GalLDH、APX、MDAR、DHAR和GR为影响ASA代谢的重要酶，并被证明参与植物对活性氧的清除作用[5]。 植物的抗寒性与活性氧代谢关系密切，低温胁迫下植物体内会产生大量的H2O2、O2-·、OH 等活性氧自由基，这些活性氧可导致膜脂过氧化，进而造成膜系统的氧化损伤。植物体内也存在着一系列酶促的和非酶促的抗氧化剂以活性氧自由基, 保护植物细胞免受活性氧的伤害，维持膜系统的稳定性，以增强植株的抗寒力。SOD、POD、CAT、APX 等被认为是清除活性氧过程中最主要的抗氧化酶类，SOD 的主要功能是清除 O2-·并产生 H2O2，而 POD、CAT可以清除体内的H2O2，APX 能通过 AsA-谷胱甘肽-NADPH 循环，催化 AsA 氧化，来清除 H2O2和 O2-，H2O2和 O2-等活性氧自由基的及时清除有利于维持植物体内的活性氧代谢平衡，从而使植物能在一定程度上忍耐、减缓或抵抗低温胁迫[3~9]。 抗坏血酸可以把细胞内产生的具有很强氧化活性的活性氧直接或间接地清除，防止活性氧的级联放大作用，阻止和延缓了细胞膜系统的脂质过氧化作用及生物大分子如蛋白质和核酸的氧化损伤，保障了细胞内各种生命代谢活动的正常进行。丙二醛（MDA）是植物在逆境伤害时脂质发生过氧化作用的产物之一，它能抑制植物叶片光合速率，降低磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)活性，加速叶绿素的降解，促进暗呼吸作用速率，增大细胞膜泄漏，表现出对光合作用的明显伤害。 1 材料与方法 1.1植物材料 供试品种：东农冬麦1号，济麦22，由东北农业大学生命科学学院植物生理教研室提供。 东农冬麦1号， 2007年经黑龙江省品种审定委员会审定推广，在黑龙江省饶河地区连续5年区域试验的越冬返青率均达到70％以上，最高可达90％。济麦22为山东省农科院作物研究所选育，该品种在黑龙江省冬季严寒条件下冻害严重，不能越冬。 1.2 实验方法 1.2.1 植物培养及处理 将小麦种子播种于铺有滤纸的培养皿中，在光照培养箱内25萌发，生长至10cm左右后，即为实验材料。 冬麦和济麦在-10分别处理24h、72h，之后恢复处理24h、72h。分别取两个品种在各处理时间点取材备用。 1.2.2 生理指标测定 生理指标包括抗坏血酸过氧化物酶（APX）、谷胱甘肽还原酶（GR）、脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）、还原型抗环血酸（ASA）、脱氢抗坏血酸（DHA）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA），各项生理指标检测方法参考《植物生理学实验》。 2 结果与分析 2．1 低温胁迫对小麦抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性的影响 APX是植物和藻类特有的清除过氧化氢(H2O2)的重要酶类,是叶绿体中AsA-GSH循环的关键酶。经低温处理济麦与对照相比24h和72h后活性明显增加，72h常温恢复，其活性降低，但仍高于对照组；冬麦1号，低温处理72h，APX活性增加，72h常温恢复后无明显变化。 图1低温胁迫对小麦抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性的影响 2．2 低温胁迫对小麦谷胱甘肽还原酶（GR）活性的影响 谷胱甘肽还原酶(GR,EC 1.6.4.2)是植物细胞AsA-