毕业论文-柳枝稷PvPIP21基因的克隆与表达导论.doc

本科生毕业论文（设计） 题 目: 柳枝稷PvPIP2;1基因的克隆与分析 姓 名: 学 院: 草业学院 专 业: 草业科学 班 级: 草业111 学 号: 指导教师: 职称: 2015年5月23日 南京农业大学教务处制 目 录 摘要……………………………………………………………………………………………3 关键词…………………………………………………………………………………………3 Abstract…………………………………………………………………………………3 Key words……………………………………………………………………………………3 引言（或绪论）……………………………………………………………………………3 1材料与方法………………………………………………………………………5 1.1试验材料 ……………………………………………………………………………6 1.1.1植物材料、试剂…………………………………………………………………………6 1.2试验方法 ……………………………………………………………………………6 1.2.1 RNA的提取与反转录…………………………………………………………………6 1.2.2 PvPIP21基因的克隆及序列测定……………………………………………………6 1.2.3荧光定量PCR分析柳枝稷PIP基因表达特性………………………………………6 1.2.4 PvPIP21序列的生物信息学分析……………………………………………………7 2结果与分析…………………………………………………………………………………7 2.1柳枝稷PIP基因全长cDNA的克隆和序列分析………………………………………… 2.1柳枝稷PIP氨基酸序列的组成分析和结构预测……………………………… 2.1柳枝稷PIP同源性和系统进化分析………………………………………………… 2.1柳枝稷PIP荧光定量PCR结果分析…………………………………………………… 3讨论……………………………………………………………………………… 1 3结论……………………………………………………………………………… 致谢……………………………………………………………………………………… 参考文献…………………………………………………………………………………… 柳枝稷PvPIP2;1基因的克隆与表达分析 摘要：柳枝稷（Panicum virgatum L.）属禾本科黍属作物，是原产于北美的多年生暖季型优良牧草。其具有耐瘠薄、抗旱、耐盐碱土壤等特性，是水土流失和荒漠化治理的理想植物。近年来，因其生物学产量和乙醇产率高，柳枝稷已成为国际上重要的生物能源植物。本实验用PCR克隆技术从柳枝稷中克隆了PvPIP2;1基因的cDNA。经生物信息学分析, 该基因开放阅读框为861 bp, 其编码的蛋白含有286个氨基酸, 蛋白分子式是 C1373H2111N353O376S9，分子量为29.87 kDa，理论等电点(pI)为8.24。对其同源性的分析表明：PvPIP2;1基因与粟（Setaria italica）PIP2-6（93%），玉米（Zea mays L.）PIP2,4（92%）的质膜水通道蛋白同源性较高。荧光定量PCR结果显示：在低温（4）、ABA和Nacl胁迫的24小时内其相对表达量均高于对照。此外光周期对其表达也产生重要影响。推测PvPIP2;1基因在柳枝稷的生长发育及逆境胁迫应答中起到重要作用。研究结果将为今后进一步探讨该基因在非生物逆境胁迫中的作用提供基础信息和研究依据。 关键词：柳枝稷；PvPIP2;1；生物信息学；非生物逆境 Cloning and Expression Analysis of the Plasma Membrane Aquaporin Gene PvPIP2;1 of Switchgrass Abstract：Switchgrass (Panicum virgatum L.